Diferença entre eletroporação e microinjeção

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Diferença entre eletroporação e microinjeção
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Vídeo: Diferença entre eletroporação e microinjeção

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Anonim

A principal diferença entre eletroporação e microinjeção é que a eletroporação é uma técnica que usa um pulso elétrico de alta voltagem para entregar DNA em células hospedeiras, enquanto a microinjeção é uma técnica que usa uma agulha de vidro de ponta fina ou micropipeta para entregar DNA em células hospedeiras.

Transformação é o processo pelo qual o DNA estranho é transferido para as células hospedeiras. Por transformação, a composição genética do organismo pode ser alterada. Existem diferentes métodos de transformação química, biológica e física. Alguns são métodos diretos, enquanto alguns são métodos indiretos. A eletroporação e a microinjeção são dois métodos físicos que são métodos de transformação direta. A eletroporação usa um campo elétrico para induzir poros microscópicos nas membranas das células biológicas para incorporar o DNA nas células hospedeiras. A microinjeção, por outro lado, fornece DNA diretamente usando uma micropipeta ou agulha de vidro de ponta fina.

O que é Eletroporação?

Eletroporação é uma técnica de transformação que entrega DNA em células vegetais e protoplastos. Esta técnica utiliza um pulso elétrico de alta tensão. Os materiais vegetais são incubados em uma solução tampão com DNA. Em seguida, a solução é submetida a um pulso elétrico de alta tensão. Os poros induzidos por alta voltagem são criados nas membranas das células vegetais e, através desses poros, o DNA migra dentro das células e se integra ao DNA genômico da planta. A eficiência deste método depende dos materiais da planta e das condições de tratamento.

Diferença entre eletroporação e microinjeção
Diferença entre eletroporação e microinjeção

Figura 01: Eletroporação

Quando a transformação é feita por eletroporação, apenas 40 a 50% das células recebem DNA. Além disso, apenas 50% das células transformadas podem sobreviver sob este método. No entanto, este método é de fácil execução e não altera a estrutura biológica ou função das células. Além disso, pode ser usado para uma ampla variedade de células.

O que é microinjeção?

A microinjeção é uma técnica de transformação que é particularmente útil na introdução de DNA em células grandes. Este método utiliza uma agulha de vidro de ponta fina ou uma micropipeta para entregar DNA em protoplastos vegetais ou células animais (oócitos, ovos e embriões). Na verdade, este método é mais adequado para fazer animais transgênicos, como camundongos. Neste método, o DNA é incorporado diretamente no núcleo ou citoplasma.

Semelhante à eletroporação, a microinjeção é uma técnica de transformação direta. A microinjeção é realizada sob uma configuração de microscópio especializada. O controle computadorizado da pipeta, agulha, platina do microscópio e tecnologia de vídeo aumentou a eficácia desta técnica. Ao injetar DNA, um corante pode ser usado para identificar facilmente as células transformadas. Portanto, não há necessidade de usar um método separado para identificar as células transformadas. Mais importante ainda, o procedimento de microinjeção não requer um gene marcador.

Diferença chave - Eletroporação vs Microinjeção
Diferença chave - Eletroporação vs Microinjeção

Figura 02: Microinjeção

Além disso, este método é muito eficaz e reprodutível. No entanto, este método é caro, demorado e requer pessoal qualificado. Além disso, apenas um pequeno número de células pode ser tratado com este método.

Quais são as semelhanças entre eletroporação e microinjeção?

  • A eletroporação e a microinjeção são dois tipos de técnicas de transformação.
  • Esses métodos entregam DNA em células vegetais e protoplastos.
  • São métodos diretos.
  • Além disso, são métodos físicos ou mecânicos.
  • Ambos os métodos são úteis na produção de plantas e animais transgênicos.

Qual é a diferença entre eletroporação e microinjeção?

A técnica de eletroporação usa um campo elétrico para introduzir o DNA enquanto a técnica de microinjeção é uma micropipeta ou uma agulha de vidro de ponta fina para introduzir o DNA. Assim, esta é a principal diferença entre eletroporação e microinjeção. Além disso, a eletroporação é usada principalmente para células vegetais e protoplastos, enquanto a microinjeção é usada principalmente para células animais. Além disso, a eletroporação não é tão demorada quanto a microinjeção.

O infográfico abaixo resume as diferenças entre eletroporação e microinjeção em forma de tabela.

Diferença entre eletroporação e microinjeção em forma tabular
Diferença entre eletroporação e microinjeção em forma tabular

Resumo – Eletroporação vs Microinjeção

Eletroporação e microinjeção são dois métodos físicos de transferência de genes. A eletroporação utiliza um campo elétrico de alta tensão enquanto a microinjeção utiliza uma agulha de vidro ou micropipeta. Assim, esta é a principal diferença entre eletroporação e microinjeção. No entanto, ambos os métodos introduzem diretamente DNA exógeno nas células hospedeiras.

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