A principal diferença entre CLIA e ECLIA é que o CLIA usa um método químico para gerar quimioluminescência enquanto o ECLIA usa um método eletroquímico para gerar sinais de quimioluminescência na técnica de imunoensaio.
Os imunoensaios são amplamente utilizados na identificação e quantificação de proteínas associadas a doenças ou infecções. Portanto, eles se baseiam principalmente no conceito de ligação anticorpo-antígeno. Existem muitos tipos de imunoensaios, sendo os imunoensaios quimioluminescentes uma dessas técnicas de desenvolvimento emergentes. Tanto o CLIA quanto o ECLIA usam indicadores quimioluminescentes.
O que é CLIA?
Imunoensaio Quimioluminescente (CLIA) é um tipo de imunoensaio que usa uma molécula luminescente para detecção. A luminescência emitida pela molécula é detectada no espectrofotômetro, geralmente em um comprimento de onda entre 300 – 800 nm. A quimioluminescência provoca a excitação dos átomos, e a técnica identifica as reações químicas exergônicas como a fonte de energia mais adequada para produzir excitação.
A técnica CLIA ocorre em dois métodos principais: técnica CLIA direta e técnica CLIA indireta. A técnica CLIA direta usa marcadores luminóforos diretos que estão ligados ao alvo, enquanto o método CLIA indireto usa marcadores enzimáticos. Os marcadores luminóforos diretos incluem ésteres de acidum e rutênio, enquanto os marcadores indiretos incluem fosfatase alcalina com substrato de adamantil 1, 2-dioxetano aril fosfato (AMPPD) e peroxidase de rábano com luminol ou seus derivados como substrato.
Figura 01: Quimioluminescência
As principais vantagens do CLIA são a ampla faixa dinâmica de funcionalidade, alta intensidade na entrega de sinal, ausência de interferência de fundo, alta especificidade, rapidez, estabilidade e compatibilidade com diferentes protocolos de ensaio. Em contraste, seu alto custo e limitações em relação à detecção de antígenos e painéis de teste são as desvantagens do CLIA.
O que é ECLIA?
Eletroquimioluminescência Imunoensaio (ELCIA) é uma nova técnica de desenvolvimento de imunoensaios que utiliza o conceito de eletroquimioluminescência. No conceito de eletroluminescência, os intermediários geram eletroquimicamente. Esses intermediários gerados eletronicamente atingem um estado excitado e resultam na emissão de luz. O comprimento de onda em que a luz é emitida corresponde ao gap de energia. A quimioluminescência é, assim, produzida devido a um ou mais reagentes serem produzidos eletroquimicamente no eletrodo.
ECLIA é uma aplicação analítica útil com alta sensibilidade e especificidade. É usado principalmente na identificação de proteínas relacionadas a diferentes condições patológicas e médicas. Suas principais vantagens incluem maior faixa dinâmica, versatilidade, controle espacial e temporal pela aplicação de potenciais de eletrodos, alta sensibilidade até faixas picomolares. No entanto, o fato de exigir manuseio especializado e o alto custo associado são suas desvantagens.
Quais são as semelhanças entre CLIA e ECLIA?
- Ambas as técnicas se baseiam no conceito de ligação antígeno-anticorpo.
- Além disso, ambos são usados principalmente para diagnóstico de doenças com base na quantificação de proteínas.
- Ambos são métodos de kit específicos e sensíveis.
- Eles usam o conceito de quimioluminescência para detecção.
- Eles podem ser automatizados.
- Ambos requerem um espectrofotômetro para detecção.
- Ambos têm uma ampla faixa dinâmica.
- São técnicas caras.
Qual é a diferença entre CLIA e ECLIA?
CLIA é uma técnica de imunoensaio que usa a teoria da quimioluminescência, enquanto o ECLIA é uma técnica de imunoensaio que usa a teoria da eletroquímica acoplada à quimioluminescência. Portanto, esta é a principal diferença entre CLIA e ECLIA. Portanto, CLIA usa reações químicas que levam ao desenvolvimento de sinais quimioluminescentes, enquanto ECLIA usa reações eletroquímicas que levam ao desenvolvimento de sinais quimioluminescentes.
O infográfico abaixo da diferença entre CLIA e ECLIA mostra mais comparações entre as duas técnicas.
Resumo – CLIA vs ECLIA
CLIA e ECLIA são ambas técnicas que desempenham um papel importante no diagnóstico de doenças. São métodos avançados de imunodiagnóstico baseados no conceito de ligação anticorpo-antígeno. A principal diferença entre CLIA e ECLIA é o método de geração de quimioluminescência. Enquanto o CLIA usa reações químicas para gerar quimioluminescência após a ligação anticorpo-antígeno, o ECLIA usa reações eletroquímicas para gerar quimioluminescência. No entanto, ambas as técnicas são rápidas e específicas.