A principal diferença entre a microscopia de fluorescência e a microscopia confocal é que na microscopia de fluorescência, toda a amostra é inundada uniformemente pela luz de uma fonte de luz, enquanto na microscopia confocal, apenas alguns pontos da amostra são expostos à luz de uma fonte de luz. fonte de luz.
A microscopia de fluorescência é uma técnica analítica importante que é útil no estudo das propriedades de substâncias orgânicas ou inorgânicas. A microscopia confocal é uma técnica analítica útil para aumentar a resolução óptica e o contraste de uma micrografia usando um pinhole espacial para bloquear a luz fora de foco na formação da imagem.
O que é Microscopia de Fluorescência?
A microscopia de fluorescência é uma técnica analítica importante que é útil no estudo das propriedades de substâncias orgânicas ou inorgânicas. O instrumento que usamos para esta medição é um microscópio de fluorescência. É um tipo de microscópio óptico. Este tipo de microscópio óptico usa fluorescência em vez de espalhamento, reflexão, atenuação e absorção ou além deles.
Um microscópio de fluorescência usa fluorescência para gerar uma imagem. Pode ser uma configuração simples, como um microscópio de epifluorescência ou um design mais complicado, incluindo um microscópio confocal que usa seccionamento óptico. Isso ajuda a obter uma melhor resolução da imagem de fluorescência.
Figura 01: Um Microscópio de Fluorescência
Ao considerar o princípio da microscopia de fluorescência, devemos usar a amostra para iluminação com luz de um comprimento de onda específico. Lá, a amostra absorve luz por fluoróforos, o que faz com que eles emitam luz de comprimentos de onda mais longos. É importante separar a luz iluminada da fluorescência emitida muito mais fraca através do uso de um filtro de emissão espectral.
Tipicamente, um microscópio de fluorescência contém uma fonte de luz, filtro de excitação, espelho dicróico e um filtro de emissão. A fonte de luz pode ser uma lâmpada de arco de xenônio, lâmpada de vapor de mercúrio, LEDs e lasers. O espelho dicróico também é conhecido como divisor de feixe dicróico.
O que é Microscopia Confocal?
A microscopia confocal é uma técnica analítica útil para aumentar a resolução óptica e o contraste de uma micrografia usando um pinhole espacial para bloquear a luz desfocada na formação da imagem. Também é conhecido como microscopia confocal de varredura a laser ou microscopia confocal de varredura a laser. É uma técnica de imagem óptica.
Nesta técnica microscópica, a captura de várias imagens 2D em diferentes profundidades em uma amostra permite a reconstrução de estruturas 3D dentro de um objeto. A técnica microscópica confocal é amplamente útil em comunidades científicas e industriais. É normalmente usado em ciências da vida, inspeção de semicondutores e ciência de materiais.
Figura 02: O Princípio do Sensor de Ponto Confocal da Patente de Minsky
Durante o processo, a luz viaja através da amostra sob um microscópio convencional o mais longe possível da amostra, enquanto um microscópio confocal que focaliza apenas um feixe menor de luz passa por um nível de profundidade estreito de cada vez. Esta técnica foi desenvolvida por Marvin Minsky em 1957.
Qual é a diferença entre microscopia de fluorescência e microscopia confocal?
A microscopia de fluorescência é uma técnica analítica importante que é útil no estudo das propriedades de substâncias orgânicas ou inorgânicas. A microscopia confocal é uma técnica analítica útil para aumentar a resolução óptica e o contraste de uma micrografia usando um pinhole espacial para bloquear a luz fora de foco na formação da imagem. A principal diferença entre a microscopia de fluorescência e a microscopia confocal é que, na microscopia de fluorescência, toda a amostra é inundada uniformemente na luz de uma fonte de luz, enquanto na microscopia confocal, apenas alguns pontos da amostra são expostos à luz de uma fonte de luz.
O infográfico abaixo apresenta as diferenças entre microscopia de fluorescência e microscopia confocal em forma de tabela para comparação lado a lado.
Resumo – Microscopia de Fluorescência vs Microscopia Confocal
A microscopia de fluorescência e a microscopia confocal são duas técnicas analíticas envolvidas na imagem óptica. A principal diferença entre a microscopia de fluorescência e a microscopia confocal é que, na microscopia de fluorescência, toda a amostra é inundada uniformemente na luz de uma fonte de luz, enquanto na microscopia confocal, apenas alguns pontos da amostra são expostos à luz de uma fonte de luz.
