A principal diferença entre imunoprecipitação e coimunoprecipitação é que a imunoprecipitação é uma técnica que precipita uma proteína da solução usando um anticorpo específico, enquanto a coimunoprecipitação é uma técnica que precipita complexos proteicos intactos da solução usando um anticorpo específico.
A interação antígeno-anticorpo é uma interação química específica entre anticorpos produzidos por células B e antígenos (proteínas) durante uma reação imune. Normalmente, os antígenos solúveis combinam-se com anticorpos solúveis na presença de um eletrólito em temperatura e pH solúvel para formar um complexo visível insolúvel. Isso é chamado de reação de precipitação. Portanto, imunoprecipitação e coimunoprecipitação são dois tipos de reações de precipitação que são usadas rotineiramente em laboratórios para identificar proteínas como antígenos.
O que é Imunoprecipitação?
Imunoprecipitação é uma técnica de precipitação de uma proteína de uma solução usando um anticorpo específico. Às vezes, essa técnica também é conhecida como imunoprecipitação de proteína individual. A imunoprecipitação usa um anticorpo para isolar uma proteína selecionada de interesse do lisado celular. O anticorpo purifica sua proteína ou antígeno alvo específico de uma mistura. O anticorpo se liga à proteína e o complexo anticorpo-antígeno é retirado da amostra. Na configuração experimental, o complexo antígeno-anticorpo é retirado usando agarose ou esferas magnéticas acopladas à proteína A/G. Mais tarde, as esferas são lavadas e a proteína de interesse é eluída. A proteína ou antígeno purificado obtido por imunoprecipitação é verificado por uma variedade de técnicas, como ensaio imunossorvente ligado a enzima (ELISA) e Western blot (WB).
Figura 01: Imunoprecipitação
Além disso, proteínas ou antígenos isolados podem ser quantificados e identificados por meio de espectrometria de massa usando padrões de digestão enzimática baseados na sequência primária. Há certas considerações antes de iniciar um experimento de imunoprecipitação: escolha do formato do método, proteínas e grânulos de ligação, escolha do anticorpo primário e isotipo corretos e controle negativo.
O que é Coimunoprecipitação?
Coimunoprecipitação é uma técnica de precipitação de complexos proteicos intactos da solução usando um anticorpo específico. A coimunoprecipitação geralmente funciona selecionando um anticorpo específico que tem como alvo uma proteína conhecida (antígeno) que se acredita ser um membro de um complexo maior de proteínas. Ao direcionar o membro conhecido com um anticorpo específico, é possível retirar todo o complexo proteico da solução. Isso permite a identificação dos membros desconhecidos do complexo. O conceito de puxar complexos de proteínas para fora da solução às vezes é chamado de mecanismo “pull-down”.
Figura 02: Coimunoprecipitação B
Coimunoprecipitação é uma técnica poderosa que é usada para analisar as interações proteína-proteína. O principal objetivo da coimunoprecipitação é a identificação de parceiros de interação, como ligantes, cofatores ou moléculas de sinalização para a proteína de interesse. Além disso, a coimunoprecipitação é uma técnica eficaz que é usada para separar proteínas do soro, lisado celular, tecido homogeneizado ou meio condicionado.
Quais são as semelhanças entre imunoprecipitação e coimunoprecipitação?
- Imunoprecipitação e coimunoprecipitação são dois tipos de técnicas baseadas em reação de precipitação.
- Ambas as técnicas podem ser usadas para identificar o antígeno alvo através de um anticorpo específico.
- Ambas as técnicas dependem fortemente da interação antígeno-anticorpo.
- Eles são usados rotineiramente em laboratórios clínicos.
Qual é a diferença entre imunoprecipitação e coimunoprecipitação?
Imunoprecipitação é uma técnica que precipita uma proteína da solução usando um anticorpo específico, enquanto a coimunoprecipitação é uma técnica que precipita complexos proteicos intactos da solução usando um anticorpo específico. Assim, esta é a principal diferença entre imunoprecipitação e coimunoprecipitação. Além disso, a imunoprecipitação é mais comumente usada em laboratórios, enquanto a coimunoprecipitação não é comumente usada em laboratórios.
O infográfico abaixo apresenta as diferenças entre imunoprecipitação e coimunoprecipitação em forma de tabela para comparação lado a lado.
Resumo – Imunoprecipitação vs Coimunoprecipitação
Imunoprecipitação e coimunoprecipitação são dois tipos de técnicas baseadas em reação de precipitação que dependem da interação antígeno-anticorpo. A técnica de imunoprecipitação precipita uma proteína da solução usando um anticorpo específico, enquanto a técnica de coimunoprecipitação precipita complexos proteicos intactos da solução usando um anticorpo específico. Então, isso resume a diferença entre imunoprecipitação e coimunoprecipitação.
