A principal diferença entre T4 DNA ligase e E. coli DNA ligase é que T4 DNA ligase é uma enzima que é isolada do bacteriófago T4, enquanto E. coli DNA ligase é uma enzima que é isolada da bactéria E. coli.
DNA ligase é um tipo específico de enzima que facilita a união de fitas de DNA através da formação de uma ligação fosfodiéster. Desempenha um papel importante reparando quebras de fita simples e quebras de fita dupla no DNA de organismos vivos. Além disso, a DNA ligase é usada tanto no reparo do DNA quanto na replicação do DNA. Além dos usos acima, a DNA ligase também tem uso extensivo em experimentos de biologia molecular, como tecnologia de DNA recombinante. T4 DNA ligase e E. coli DNA ligase são dois tipos de enzimas DNA ligase.
O que é T4 DNA Ligase?
T4 ligase é uma enzima de junção de DNA que é isolada do bacteriófago T4. O bacteriófago T4 é um vírus que infecta a Escherichia coli. A enzima ligase T4 é a ligase de DNA mais comumente usada em pesquisas laboratoriais de biologia molecular. Normalmente, a T4 ligase catalisa a união de duas fitas coesivas ou de extremidades cegas de DNA de fita dupla entre os grupos 5' fosfato e 3' hidroxila de nucleotídeos adjacentes. Também pode catalisar a união de RNA a uma fita de DNA ou RNA em uma molécula duplex. No entanto, esta enzima não irá unir ácidos nucleicos de fita simples. Além disso, ele também pode ligar DNA de extremidades cegas com eficiência muito maior do que a ligase de DNA de E. coli.
Figura 01: T4 DNA Ligase
Esta enzima requer ATP como cofator. Alguns experimentos de pesquisa de engenharia genética já produziram enzimas de DNA ligase mais ativas do que T4 DNA ligase de tipo selvagem. Em uma das abordagens, eles criaram uma molécula de enzima de fusão combinando a T4 DNA ligase com a molécula p50 ou NF-kB. Esta nova enzima ligase de T4 foi 160% mais ativa em ligações de extremidades cegas para fins de clonagem do que a ligase de DNA de T4 de tipo selvagem. Além disso, a temperatura ideal para a T4 DNA ligase catalisar a reação de ligação com mais precisão é de 16 °C.
O que é E Coli DNA Ligase?
E. coli DNA ligase é uma enzima que é isolada da bactéria E. coli. O gene responsável pela produção da DNA ligase de E. coli é o gene lig. O DNA de E. coli, a ligase, assim como a maioria das DNA ligases de procariontes, usa a energia que é ganha pelo NAD (nicotinamida adenina dinucleotídeo) para criar a ligação fosfodiéster.
Figura 02: E. Coli DNA Ligase
E. coli DNA ligase é uma enzima de ligação que pode unir fragmentos de DNA catalisando a formação de ligações fosfodiéster entre fragmentos de DNA de fita dupla contendo terminais 5' fosfato e terminais 3' hidroxila. Além disso, não liga DNA de extremidades cegas, exceto sob condições especiais, como aglomeração molecular com polietilenoglicol. Também não pode unir RNA ao DNA de forma eficiente. Além disso, a atividade da DNA ligase de E. coli pode ser aumentada pela presença da DNA polimerase 1 na concentração correta. No entanto, quando a concentração da enzima DNA polimerase 1 é maior, ela tem efeitos adversos na atividade da DNA ligase de E. coli.
Quais são as semelhanças entre T4 DNA Ligase e E Coli DNA Ligase?
- T4 DNA ligase e E-coli DNA ligase são dois tipos de enzimas DNA ligase.
- Ambos são proteínas compostas de aminoácidos.
- Essas enzimas catalisam a formação de uma ligação fosfodiéster entre os terminais 5' fosfato e 3' hidroxila justapostos no DNA duplex.
- Eles têm amplo uso em experimentos de biologia molecular, como tecnologia de DNA recombinante.
Qual é a diferença entre T4 DNA Ligase e E Coli DNA Ligase?
T4 DNA ligase é uma enzima que é isolada do bacteriófago T4 enquanto E. coli DNA ligase é uma enzima que é isolada da bactéria E. coli. Assim, esta é a principal diferença entre a ligase de DNA de T4 e a ligase de DNA de E. coli. Além disso, a fonte de energia para a T4 DNA ligase é o ATP. Por outro lado, a fonte de energia para E. coli DNA ligase é NAD.
O infográfico abaixo apresenta as diferenças entre T4 DNA ligase e E coli DNA ligase em forma de tabela para comparação lado a lado.
Resumo – T4 DNA Ligase vs E Coli DNA Ligase
T4 DNA ligase e E. coli DNA ligase são duas enzimas que catalisam a formação de uma ligação fosfodiéster entre 5' fosfato justaposto e 3' hidroxil terminais no DNA duplex. T4 ligase é uma enzima que é isolada do bacteriófago T4, enquanto E. coli DNA ligase é uma enzima que é isolada de bactérias E. coli. Então, esta é a principal diferença entre T4 DNA ligase e E coli DNA ligase.
