Key Difference – UFC vs MPN
Unidade Formadora de Colônias (UFC) e Número Mais Provável (NMP) são dois métodos usados para enumerar microrganismos em amostras. Ambos os parâmetros são usados para detectar a qualidade da água e bactérias indicadoras fecais em amostras de água. Unidade formadora de colônia é uma medida usada para enumerar o número de células bacterianas viáveis ou células fúngicas em volume ou peso específico de uma determinada amostra. A unidade padrão para este parâmetro é UFC/ml ou UFC/g. O número mais provável é outra unidade usada para medir o número de células bacterianas viáveis em uma amostra líquida. A principal diferença entre UFC e MPN é que o UFC é calculado a partir das colônias bacterianas e fúngicas que crescem em uma placa de ágar sólido, enquanto o MPN é calculado a partir de bactérias viáveis crescendo em meio líquido.
O que é UFC?
Unidade formadora de colônias (UFC) é um parâmetro que mede o número de células bacterianas ou fúngicas viáveis em uma determinada amostra. O método que conta as unidades formadoras de colônias é referido como contagem de placas padrão. As colônias viáveis que aparecem nas placas de ágar são expressas como UFC por 1 ml (unidade formadora de colônia por mililitro) da amostra para líquidos ou UFC por 1 g (unidade formadora de colônia por um grama) da amostra para sólidos.
Existem dois métodos comuns usados para medir UFC em uma amostra. Eles são o método da placa espalhada e o método da placa de derramamento. Esses dois métodos são suportados por uma técnica chamada diluição em série. Amostras diluídas em série permitem obter um número contável de colônias na superfície do ágar. Um volume conhecido de amostra pode ser espalhado na superfície de uma placa de ágar, ou misturado com ágar e despejado em uma placa. A placa é então incubada e as colônias que surgem são contadas. O número de colônias está relacionado ao número de microrganismos na amostra original. As placas que mostram muitas colônias ou poucas colônias são excluídas da contagem porque os resultados podem não ser estatisticamente precisos nessas placas. Estatisticamente, o melhor intervalo é de 30 a 300 colônias em uma placa de ágar. Portanto, as placas corretas devem ser selecionadas para uma enumeração precisa. A diluição em série é realizada para a função acima.
Depois de contar o número de colônias viáveis nas placas, CFU/ml pode ser calculado usando a seguinte equação.
UFC por ml de amostra original=número de colônias em uma placa X fator de diluição
Fator de diluição=(1/ Diluição da placa)
Por exemplo, se você obtiver 149 colônias na placa da diluição 10-4, o número de bactérias em 1 ml da amostra original pode ser calculado da seguinte forma:
UFC/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 ou 1490000
=1. 49 x 106
Figura 01: Unidade Formadora de Colônia
O que é MPN?
O número mais provável é uma medida alternativa para UFC/ml. O MPN também estima as células viáveis em uma amostra líquida. Conta organismos que crescem em cultura líquida e é uma técnica predominantemente bacteriológica. Este método é particularmente útil para amostras que contêm baixas concentrações de células bacterianas; por exemplo, leite, água potável, etc. O valor MPN é expresso para 100 ml de volume. O MPN conta com um método estatístico baseado na teoria da probabilidade. Existem tabelas estatísticas projetadas para encontrar valores de MPN por 100 ml de amostra. Essas tabelas mostram os resultados com limites de confiança de 95%.
O valor MPN é calculado após a execução de uma técnica chamada método de fermentação em tubo múltiplo. Três conjuntos de tubos contendo um meio de cultura adequado são inoculados com três volumes diferentes da amostra, como 10 ml, 1 ml e 0.1 ml e incubado para o crescimento. Após o período de incubação, os tubos são pontuados + (positivo) ou – (negativo) para a presença ou ausência de crescimento. O padrão de resultados positivos e negativos são então comparados com uma tabela MPN de probabilidades estatísticas para estimar o número de microrganismos. Em seguida, o valor MPN é dado para 100 ml da amostra. O MPN é amplamente utilizado para detectar bactérias coliformes presentes em amostras de água.
Figura 02: Tabela MPN
Qual é a diferença entre UFC e MPN?
CFU vs MPN |
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| CFU é uma medida usada para expressar o número de colônias de bactérias ou fungos viáveis em uma determinada amostra. | MPN é uma medida alternativa à UFC e mede o número de células bacterianas viáveis em uma amostra líquida. |
| Unidade | |
| UFC/ml ou UFC/g | MPN/100ml |
| Cálculo | |
| CFU é calculado contando o número de colônias cultivadas em placas de ágar. | MPN é calculado comparando os padrões positivos e negativos dos tubos com a tabela estatística MPN. |
| Técnica de diluição em série | |
| A diluição em série é realizada antes de colocar as amostras em placas de ágar. | A diluição serial normalmente não é realizada quando o MPN é calculado |
| Métodos | |
| Método de placa de espalhamento e método de placa de despejo são dois tipos de métodos executados para obter UFC. | A fermentação em tubo múltiplo é o método realizado para obter o valor de MPN. |
Resumo – UFC vs MPN
A medição do crescimento microbiano é necessária por vários motivos. Nas fábricas de processamento de alimentos, é necessário medir o nível e o tipo de microrganismos nos alimentos. Na indústria alimentícia e na medicina, é necessário garantir que os tratamentos de esterilização sejam efetivamente aplicados. Em estações de tratamento de esgoto, é necessário fazer a contagem microbiana rotineiramente. Ao otimizar o procedimento em biologia molecular, é necessário medir o número de colônias nas placas. Portanto, existem diferentes métodos de enumeração e medição de crescimento disponíveis. UFC e MPN são dois desses métodos amplamente adotados em vários campos. UFC é uma medida do número de colônias de bactérias e fungos viáveis presentes em uma determinada amostra. É calculado usando o método de contagem de placas padrão ou o método de contagem de placas viável. MPN é outra medida que expressa o número de células bacterianas presentes em um determinado volume da amostra líquida. É calculado usando o método de fermentação de tubo múltiplo e a tabela MPN. Esta é a diferença entre UFC e MPN.
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