A principal diferença entre eluição isocrática e gradiente é que a eluição isocrática se refere à manutenção de uma concentração constante na fase móvel, enquanto a eluição gradiente se refere à manutenção de uma concentração variável na fase móvel.
Os termos eluição isocrática e gradiente são usados em cromatografia. Durante uma corrida cromatográfica, usamos uma fase estacionária, que é uma substância imóvel, juntamente com uma fase móvel, a substância em movimento. A eluição isocrática e gradiente descreve as propriedades da fase móvel.
O que é Eluição Isocrática?
Eluição isocrática é um termo usado em cromatografia quando a fase móvel tem concentração constante. Aqui, a concentração da fase móvel é constante durante todo o processo cromatográfico. Neste processo, podemos observar a largura do pico aumentando com o tempo de retenção linearmente no cromatograma. No entanto, isso leva a uma desvantagem - os picos de eluição tardia para eluição tardia ficam muito planos e amplos. Portanto, esses picos amplos tornam-se difíceis de serem reconhecidos como picos.
Além disso, na eluição isocrática, a seletividade não muda de acordo com as dimensões da coluna. Isso significa que a seletividade não depende das alterações nas dimensões da coluna. Aqui, o comprimento e o diâmetro são considerados como dimensões da coluna. Portanto, os picos eluem na mesma ordem.
O que é Eluição Gradiente?
Eluição gradiente é um termo usado em cromatografia quando aqui a fase móvel tem uma concentração variável. Em outras palavras, a concentração da fase móvel não precisa permanecer constante. Por exemplo, em HPLC, um método de separação comum usa metanol 10% inicialmente e termina em 90%, aumentando a concentração gradualmente. A fase móvel tem dois componentes: um solvente fraco e um solvente forte. O solvente fraco permite que o soluto elua lentamente, enquanto o solvente forte causa a eluição rápida do soluto. Na cromatografia de fase reversa, usamos água como solvente fraco e solvente orgânico como solvente forte.
Figura 01: HPLC
Além disso, o método de eluição de gradiente diminui os componentes de eluição posteriores para torná-los eluídos mais rapidamente, dando um pico estreito no cromatograma. Este método melhora a forma do pico e a altura do pico também. Além disso, na técnica de eluição gradiente, a ordem de eluição muda com as mudanças nas dimensões da coluna.
Qual é a diferença entre eluição isocrática e gradiente?
Os termos eluição isocrática e gradiente são usados em cromatografia. A eluição isocrática e gradiente descrevem as propriedades da fase móvel. A principal diferença entre eluição isocrática e gradiente é que a eluição isocrática refere-se à manutenção de uma concentração constante na fase móvel, enquanto a eluição gradiente refere-se à manutenção de uma concentração variável na fase móvel.
Na técnica de eluição isocrática, a largura do pico aumenta linearmente com o tempo de retenção. No entanto, na técnica de eluição em gradiente, a retenção dos componentes de eluição tardia é diminuída, de modo que a eluição se torna mais rápida e produz picos estreitos. Além disso, na eluição isocrática, a seletividade não depende das dimensões da coluna, mas na eluição gradiente, a seletividade muda com a mudança das dimensões da coluna.
A tabela a seguir resume a diferença entre eluição isocrática e gradiente.
Resumo – Eluição Isocrática vs Gradiente
Eluição isocrática e eluição em gradiente descrevem as propriedades da fase móvel. A principal diferença entre eluição isocrática e gradiente é que a eluição isocrática refere-se à manutenção de uma concentração constante na fase móvel, enquanto a eluição gradiente refere-se à manutenção de uma concentração variável na fase móvel.
