Key Difference – HPLC vs HPTLC
A principal diferença entre HPLC e HPTLC é que HPLC permite a separação quantitativa de componentes em uma amostra, enquanto HPTLC não permite a separação quantitativa de componentes em uma amostra.
Cromatografia é um método de separação física que é usado para separar e identificar os componentes de uma mistura. Tanto HPLC como HPTLC são técnicas cromatográficas. HPLC é cromatografia líquida de alta eficiência. HPTLC é cromatografia de camada fina de alto desempenho.
O que é HPLC?
HPLC é cromatografia líquida de alta eficiência. É uma técnica analítica usada para separar, identificar e quantificar componentes em uma mistura. Nesta técnica, a amostra é dissolvida em um solvente adequado. Em seguida, o solvente com a amostra é passado por uma bomba com uma determinada pressão. A bomba é preenchida com material adsorvente sólido. Em seguida, alguns componentes ligam-se fortemente ao material absorvente, enquanto outros componentes ligam-se frouxamente. Isso faz com que os componentes tenham diferentes vazões através da bomba. Portanto, os componentes podem ser separados facilmente.
Figura 01: Um sistema de HPLC
O material adsorvente que enche a bomba é conhecido como fase estacionária. O solvente com a amostra dissolvida é conhecido como fase móvel. A bomba usada nesta técnica é chamada de coluna. A coluna é preenchida com um material adsorvente, mais comumente, partículas de sílica. O tamanho dessas partículas pode variar de 2-50 μm. O processo de separação é afetado pela composição da fase móvel e pela temperatura do sistema. As interações entre a fase estacionária e o componente na amostra podem ser interações hidrofóbicas, interações dipolo-dipolo, ligação iônica, etc.
A pressão de operação do HPLC é consideravelmente maior que a da cromatografia líquida tradicional. Encontra-se em torno de 50-350 bar. A diferença entre cromatografia líquida e HPLC é que na cromatografia líquida, a amostra cai através da coluna por gravidade, enquanto que, em HPLC, a amostra é pressurizada através da coluna. O tamanho da coluna e as partículas absorventes também são muito pequenas quando comparadas à cromatografia líquida tradicional. No entanto, a resolução dada pela técnica de HPLC é superior.
O que é HPTLC?
HPTLC é cromatografia de camada fina de alto desempenho. É a forma avançada e automatizada do TLC tradicional. Esta técnica fornece uma resolução eficiente em um curto período de tempo. Neste método de análise, a amostra e uma referência podem ser analisadas ao mesmo tempo, o que permite que a amostra seja comparada com a referência. Proporciona uma precisão analítica melhorada do que outras técnicas cromatográficas. O tempo gasto para a análise é menor. A técnica é uma técnica de baixo custo.
Figura 02: Análise de Corantes Alimentares usando HPTLC
O método HPTLC é um processo simples, e a etapa de preparação da amostra também é eliminada (no TLC tradicional, a etapa de preparação da amostra é incluída antes da separação. Esta etapa envolve limpeza e enriquecimento). O solvente pode ser usado diretamente sem qualquer pré-tratamento, embora outras técnicas cromatográficas exijam pré-tratamentos, como desgaseificação, filtração, etc.
O material adsorvente usado em HPTLC é sílica com tamanhos de partículas muito pequenos. Na TLC tradicional, o tamanho das partículas de sílica é de 5-20 μm, enquanto que no HPTLC é de 4-8 μm. A amostra é aplicada à placa HPTLC usando um aplicador. Dá uma aplicação uniforme e segura. Em seguida, as placas são colocadas em uma câmara com a fase móvel. A câmara deve estar saturada com o vapor da fase móvel. Após o processo de HPTLC, os pontos que se moveram podem ser detectados. Ao detectar as manchas na placa, a técnica HPTLC usa uma região UV adequada ou uma câmara de iodo.
Qual é a diferença entre HPLC e HPTLC?
HPLC vs HPTLC |
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| HPLC é cromatografia líquida de alta eficiência. | HPTLC é cromatografia em camada fina de alto desempenho. |
| Técnica | |
| Em HPLC, a fase móvel com o solvente passa por uma coluna preenchida com a fase estacionária. | Em HPTLC, a amostra é manchada em uma placa de TLC e é colocada dentro de uma câmara contendo a fase móvel; então a amostra pode migrar para cima da placa junto com a fase móvel. |
| Medição | |
| Em HPLC, as diferenças entre as taxas de fluxo dos componentes através da coluna são usadas para separar os componentes na amostra. | No HPTLC, as diferenças entre as distâncias percorridas por cada componente da amostra são usadas para separar os componentes da amostra. |
| Separação Quantitativa | |
| HPLC permite a separação quantitativa de componentes em uma amostra. | HPTLC não permite a separação quantitativa de componentes em uma amostra. |
Resumo – HPLC vs HPTLC
HPLC e HPTLC são duas técnicas cromatográficas. A principal diferença entre HPLC e HPTLC é que o HPLC permite a separação quantitativa de componentes em uma amostra, enquanto o HPTLC não permite a separação quantitativa de componentes em uma amostra.
