Diferença chave – Imunocitoquímica vs Imunohistoquímica
Imunocitoquímica (ICC) e Imuno-histoquímica (IHQ) são duas técnicas amplamente utilizadas no diagnóstico molecular, que identifica e confirma a ocorrência tanto de doenças não transmissíveis quanto de doenças transmissíveis com base nos marcadores moleculares presentes nas células. A principal diferença imunocitoquímica e imunohistoquímica é a molécula que é usada como procedimento de análise nessas técnicas. Na ICC, são usados anticorpos primários e secundários conjugados com marcadores, como fluorescência, enquanto IHQ, anticorpos monoclonais e policlonais são usados para as determinações diagnósticas.
O que é Imunocitoquímica (ICC)?
ICC usa anticorpos primários e secundários ligados a marcadores como marcadores fluorescentes ou enzimas e é um método de detecção poderoso para detectar antígenos presentes em células-alvo que podem ser partículas celulares infecciosas ou células tumorais cancerígenas. Três tipos de controles são necessários para imunocitoquímica.
- Anticorpo primário – controle que mostra a especificidade da ligação do anticorpo primário ao antígeno
- Anticorpo Secundário – controle que mostra que o rótulo é específico para o anticorpo primário
- Label Controls – mostra que a rotulagem é o resultado do rótulo adicionado e não o resultado da rotulagem endógena.
Figura 01: A imunocitoquímica marca proteínas individuais dentro das células (aqui, a Tirosina hidroxilase nos axônios dos neurônios autônomos simpáticos é mostrada em verde).
O controle de anticorpo primário é específico para cada novo anticorpo e não pode ser repetido para cada experimento. O controle de anticorpo secundário é projetado com base no anticorpo primário utilizado no experimento e está incluído em cada experimento. O controle de rotulagem é incluído se uma condição do procedimento for alterada, a amostra for alterada ou quando uma rotulagem inesperada for encontrada.
As duas principais aplicações do ICC são Radio Immuno-Assay (RIA) e Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). O anticorpo mais comum usado é a imunoglobulina G.
O que é imunohistoquímica (IHC)?
Em Imuno-histoquímica, a amostra fonte contém anticorpos monoclonais e policlonais para determinar a presença de antígenos em células estranhas. Esta técnica é baseada na reação específica de ligação antígeno-anticorpo. Os anticorpos usados na detecção podem ser marcados com diferentes marcadores; eles podem ser marcadores de fluorescência, marcadores radiomarcados ou marcadores químicos. Ao facilitar a ligação in vitro entre o antígeno e o anticorpo alvo, a presença ou a ausência de uma determinada proteína de uma célula pode ser determinada.
Figura 02: Coloração imunohistoquímica de rim normal com CD10
Atualmente, os cientistas estão envolvidos no desenvolvimento de anticorpos-alvo para antígenos específicos presentes em células que podem se desenvolver como células tumorais malignas ou antígenos presentes em agentes infecciosos como o HIV.
Quais são as semelhanças entre imunocitoquímica e imunohistoquímica?
- As reações são altamente específicas e precisas em ICC e IHC.
- As aplicações do ICC e IHC incluem diagnósticos de câncer e doenças infecciosas.
- As condições estéreis devem ser mantidas em ambas as condições, e devem ser realizadas in vitro
- Ambas as técnicas fornecem resultados reproduzíveis.
- Ambos são rápidos.
- Rotulagem de rádio, técnicas de fluorescência são usadas como métodos de detecção em ICC e IHC.
- Ambos são baseados no emparelhamento antígeno-anticorpo.
Qual é a diferença entre imunocitoquímica e imunohistoquímica?
Imunocitoquímica (ICC) vs Imuno-histoquímica (IHC) |
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| ICC usa marcadores ligados a anticorpos primários e secundários, como marcadores fluorescentes ou enzimas, e é um método de detecção poderoso para detectar antígenos presentes nas células-alvo. | IHC é um método que utiliza anticorpos monoclonais e policlonais para determinar a presença de antígenos que são marcadores de proteínas especiais colocados nas superfícies celulares. |
| Fonte da amostra | |
| Amostras derivadas de tecidos que foram processados histologicamente em cortes finos são usadas em ICC. | IHC utiliza amostras constituídas por células cultivadas em monocamada ou células em suspensão que são depositadas em lâmina. |
| Processamento de Amostra | |
| Na ICC, as células devem ser permeáveis para facilitar a penetração do anticorpo nos alvos intracelulares. | Na IHC, as células são fixadas em formalina, embebidas em parafina antes da coloração. |
Resumo – Imunocitoquímica vs Imunohistoquímica
O diagnóstico molecular é usado para identificar e confirmar a ocorrência de doenças não transmissíveis e doenças transmissíveis com base nos marcadores moleculares presentes nas células. Os marcadores moleculares podem ser proteínas ou sequências de DNA ou RNA; o desenvolvimento de tecnologias como ICC e IHC abriram o caminho para os cientistas identificarem a doença e sua causa em um estágio inicial. Tanto o ICC quanto o IHC dependem das reações específicas entre o anticorpo e o antígeno, embora a fonte da amostra. A principal diferença entre imunocitoquímica e imunohistoquímica é o processamento da amostra dos dois procedimentos.
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