Diferença Chave - Eletroforese em Gel vs Página SDS
A eletroforese em gel é uma técnica que separa macromoléculas em um campo elétrico. É um método comum em biologia molecular separar DNA, RNA e proteínas de misturas de acordo com seus tamanhos moleculares. SDS Page é um tipo de eletroforese em gel que é usado para separar proteínas de uma mistura de proteínas com base em seus tamanhos. Eletroforese em gel é um termo usado para se referir à técnica normal aplicada para separação de DNA, RNA e proteína, enquanto SDS Page é um tipo de eletroforese em gel. Esta é a principal diferença entre eletroforese em gel e SDS Page.
O que é Eletroforese em Gel?
A eletroforese em gel é uma técnica comum usada em laboratórios para separar moléculas carregadas, como DNA, RNA, proteínas, etc. de suas misturas. Um gel é usado na eletroforese em gel. Atua como uma peneira molecular. Existem dois tipos de géis usados na eletroforese em gel: agarose e poliacrilamida. A seleção do gel e a preparação do gel são fatores importantes a serem considerados nas eletroforeses em gel, uma vez que o tamanho dos poros do gel deve ser cuidadosamente manipulado para uma boa separação das moléculas através da eletroforese em gel. A eletroforese em gel tem um campo elétrico conectado a duas extremidades do gel. Uma extremidade do gel mostra uma carga positiva enquanto a outra extremidade é carregada negativamente.
DNA e RNA são moléculas carregadas negativamente. Uma vez que eles são carregados no gel a partir da extremidade negativa do gel e aplicados ao campo elétrico, eles migram através dos poros do gel em direção à extremidade carregada positivamente do gel. A velocidade da migração depende da carga e do tamanho da molécula. Moléculas menores migram facilmente através dos poros do gel do que moléculas maiores. Assim, moléculas menores percorrem uma longa distância através do gel e as moléculas maiores percorrem uma curta distância. Para observar o deslocamento das moléculas no gel, são usados tipos especiais de corantes. O campo elétrico é aplicado por um determinado período de tempo e parado para evitar a perda de moléculas e para manter as moléculas em suas posições percorridas. Diferentes bandas podem ser observadas no gel. Essas bandas representam as moléculas de diferentes tamanhos. Portanto, a eletroforese em gel é útil para diferenciar moléculas de acordo com seus tamanhos.
A eletroforese em gel é incorporada em várias técnicas como técnica preparativa em Biologia Molecular, como PCR, RFLP, clonagem, sequenciamento de DNA, Southern blotting, mapeamento de genoma, etc.
Figura 01: Eletroforese em gel de agarose
O que é página SDS?
Eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecil sulfato de sódio (página SDS) é um tipo de eletroforese em gel usado para separar proteínas. Quando a eletroforese em gel é usada para separar proteínas, são necessários tratamentos especiais, pois as proteínas não são carregadas negativamente como DNA e RNA e não migram para o lado positivo ou negativo. Assim, as proteínas são desnaturadas e revestidas com uma carga negativa antes da eletroforese em gel. É feito usando um detergente chamado dodecil sulfato de sódio (SDS). A eletroforese em gel que utiliza SDS e um gel de poliacrilamida como meio de suporte é conhecida como SDS Page. Esta técnica é comumente usada em bioquímica, genética, forense e biologia molecular.
Durante o SDS Page, as proteínas são misturadas com o SDS. O SDS desdobra as proteínas em uma forma linear e as reveste com uma carga negativa proporcional à sua massa molecular. Devido à carga negativa, as moléculas de proteína migram em direção à extremidade de carga positiva do gel e se separam de acordo com suas massas moleculares. No SDS Page, a poliacrilamida é usada como suporte sólido para o gel. A separação real das proteínas depende principalmente das propriedades do gel. Portanto, a preparação do gel de poliacrilamida deve ser feita com cuidado e as concentrações corretas de poliacrilamida devem ser usadas. Os géis de poliacrilamida apresentam alta resolução do que os géis de agarose. Portanto, SDS Page é considerada uma técnica de alta resolução para separação de proteínas.
SDS Page é um tipo de eletroforese em gel desnaturante. Tem uma grande limitação na análise de proteínas. Como o SDS desnatura as proteínas antes da separação, ele não permite a detecção de atividade enzimática, interações de ligação de proteínas, cofatores de proteínas, etc.
Figura 02: página SDS
Qual é a diferença entre a Eletroforese em Gel e a Página SDS?
Eletroforese em Gel vs Página SDS |
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| A eletroforese em gel é um método realizado para separar macromoléculas usando um campo elétrico. | SDS Page é uma técnica de eletroforese em gel de alta resolução usada para separar proteínas com base em sua massa. |
| Gel Run | |
| Pode ser realizado de forma horizontal ou vertical. | SDS A página sempre é executada na vertical. |
| Base para Separação | |
| A separação ocorre de acordo com a carga e o tamanho. | A separação das proteínas ocorre de acordo com a massa e carga. |
| Resolução | |
| Eletroforese em gel de agarose tem baixa resolução e eletroforese em gel de poliacrilamida tem resolução mais alta | A página SDS tem uma resolução melhor. |
| Desnaturação | |
| A eletroforese em gel inclui técnicas desnaturantes e não desnaturantes. | SDS Page desnatura as proteínas antes da separação. |
Resumo – Eletroforese em Gel vs Página SDS
A eletroforese em gel é uma técnica comum usada para separação e análise de DNA, RNA e proteínas com base em seu tamanho e carga. Existem dois tipos principais de eletroforese em gel, a saber, eletroforese em gel de agarose e eletroforese em gel de poliacrilamida. Os géis de agarose são usados principalmente para a separação de ácidos nucleicos; quando é necessária maior resolução, são usados géis de poliacrilamida. SDS Page é um tipo de eletroforese em gel comumente usado para separar misturas complexas de proteínas. É considerada uma técnica de separação de proteínas de alta resolução. Esta é a diferença entre eletroforese em gel e SDS Page.
