A principal diferença entre a eletroforese em gel de agarose e poliacrilamida é que a eletroforese em gel de agarose usa géis de agarose derramados horizontalmente para separar fragmentos comparativamente maiores de DNA, enquanto a eletroforese em gel de poliacrilamida usa géis de poliacrilamida vazados verticalmente para separar fragmentos de ácido nucleico mais curtos.
Eletroforese é um tipo de técnica que usa um campo elétrico aplicado em uma matriz de gel para separar biomoléculas como DNA, RNA e proteínas. Essa separação de biomoléculas como DNA, RNA e proteínas por eletroforese é baseada na carga e no tamanho. As amostras são carregadas nos poços do gel. Mais tarde, o campo elétrico é aplicado através do gel. O campo faz com que as moléculas carregadas negativamente se movam em direção ao eletrodo positivo. A matriz de gel atua como uma peneira molecular através da qual as moléculas menores passam ou viajam rapidamente enquanto as moléculas maiores se movem lentamente. Isso permite a separação de moléculas com base na carga e no tamanho. Portanto, a eletroforese em gel de agarose e poliacrilamida são dois tipos de técnicas de eletroforese em gel que ajudam principalmente a separar moléculas com base em seu tamanho e carga.
O que é eletroforese em gel de agarose?
A eletroforese em gel de agarose é uma técnica que usa géis de agarose para separar biomoléculas como DNA e RNA. É uma técnica usada para separar ácidos nucleicos principalmente por tamanho. O principal composto chamado agarose usado nesta técnica é um polissacarídeo. Ele vem de algas marinhas. A agarose pode ser dissolvida em tampão de ebulição e então pode ser despejada em uma bandeja que é mantida horizontalmente. Na bandeja, solidifica-se quando esfria para formar uma laje. Os géis de agarose são derramados com um pente no lugar para fazer poços nos quais ácidos nucleicos, como DNA ou RNA, são carregados assim que o gel se solidifica.
Figura 01: Eletroforese em Gel de Agarose
O gel é posteriormente imerso em um tampão apropriado e uma corrente é aplicada através do gel. O DNA tem uma carga negativa uniforme que é independente da composição da sequência da molécula. Portanto, as moléculas de DNA migrarão do cátodo (-) em direção ao ânodo (+). A taxa de migração é diretamente dependente do tamanho da molécula. As maiores macromoléculas têm mais dificuldade em navegar pelo gel. Por outro lado, as macromoléculas menores deslizam rapidamente e facilmente pelo gel.
O que é eletroforese em gel de poliacrilamida?
A eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) é uma técnica que utiliza géis de poliacrilamida para separar biomoléculas. É uma técnica amplamente utilizada para separar macromoléculas biológicas, geralmente proteínas e ácidos nucléicos, de acordo com sua mobilidade eletroforética. A hidratação da acrilonitrila resulta na formação de moléculas de acrilamida pela nitrila hidratase. A acrilamida é solúvel em água e, após a adição de iniciadores de radicais livres, a acrilamida polimeriza, resultando na formação de gel de poliacrilamida. Normalmente, concentrações aumentadas de acrilamida resultam na diminuição do tamanho dos poros no gel. Os géis de poliacrilamida são derramados verticalmente, ao contrário dos géis de agarose.
Figura 02: Eletroforese em Gel de Poliacrilamida
Na eletroforese em gel de poliacrilamida, as moléculas podem funcionar em seu estado nativo, preservando a estrutura de ordem superior das moléculas. Esse método é chamado de PAGE nativo. Alternativamente, um desnaturante químico também pode ser adicionado para remover a estrutura de ordem superior e transformar a molécula em uma molécula não estruturada cuja mobilidade depende apenas de seu comprimento. Este tipo é chamado SDS-PAGE.
Quais são as semelhanças entre a agarose e a eletroforese em gel de poliacrilamida?
- Eletroforese em gel de agarose e poliacrilamida são dois tipos de técnicas de eletroforese em gel.
- Na verdade, são técnicas de biologia molecular.
- Ambas as técnicas são usadas para detectar macromoléculas biológicas como DNA e proteínas.
- Estas técnicas são feitas por técnicos ou pesquisadores qualificados.
- Em ambas as técnicas, a separação das macromoléculas é baseada na carga e no tamanho.
- Ambas as técnicas permitem a separação de ácidos nucléicos como DNA e RNA.
Qual é a diferença entre a eletroforese em gel de agarose e poliacrilamida?
A eletroforese em gel de agarose é uma técnica que usa géis de agarose derramados horizontalmente para separar biomoléculas, enquanto a eletroforese em gel de poliacrilamida é uma técnica que usa géis de poliacrilamida derramados verticalmente para separar biomoléculas. Esta é a principal diferença entre a eletroforese em gel de agarose e poliacrilamida. Além disso, a eletroforese em gel de agarose é usada para a separação de DNA e RNA, enquanto a eletroforese em gel de poliacrilamida é usada para a separação de ácidos nucleicos, como DNA, RNA ou proteínas.
A tabela a seguir resume a diferença entre a eletroforese em gel de agarose e poliacrilamida.
Resumo – Agarose vs Eletroforese em Gel de Poliacrilamida
Agarose e eletroforese em gel de poliacrilamida são dois tipos de técnicas de eletroforese em gel usadas em laboratórios de biologia molecular. A eletroforese em gel de agarose usa um gel de agarose para separar biomoléculas. A agarose geralmente não é tóxica para humanos, enquanto a poliacrilamida é tóxica para humanos. Além disso, a eletroforese em gel de agarose apresenta baixa resolução, enquanto a eletroforese em gel de poliacrilamida apresenta maior resolução. A eletroforese em gel de poliacrilamida usa um gel de poliacrilamida para separar biomoléculas. Isso resume a diferença entre a eletroforese em gel de agarose e poliacrilamida
