Diferença de Chave - Cultura de Células Primária vs Secundária
Antes de discutir a diferença entre Cultura Celular Primária e Secundária, vamos primeiro definir brevemente o que é cultura celular. A cultura de células é o processo de remoção de células de um animal ou planta e subsequente crescimento em um ambiente artificialmente controlado. As células podem ser removidas diretamente do tecido e desagregadas por métodos enzimáticos ou mecânicos ou podem ser derivadas de uma cultura já estabelecida. A principal diferença entre a cultura de células primária e secundária é que as células para a cultura de células primárias são obtidas diretamente de um tecido animal ou vegetal, enquanto as células para a cultura de células secundárias são obtidas de uma cultura primária já estabelecida. Portanto, a cultura secundária é uma nova cultura originada da cultura primária.
Vamos analisar melhor o significado de cultura de células primárias e secundárias para diferenciá-las melhor.
O que é Cultura de Células Primárias?
Cultura de células primárias é a dissociação de células de um animal parental ou tecido vegetal por meio de medidas enzimáticas ou mecânicas e mantendo o crescimento das células em um substrato adequado em recipientes de vidro ou plástico sob condições ambientais controladas. As células em cultura primária têm o mesmo cariótipo (número e aparência de cromossomos no núcleo de uma célula eucariótica) que as células do tecido original. A cultura de células primárias pode ser classificada em duas com base no tipo de células usadas na cultura.
Célula Dependente de Ancoragem ou Célula Aderente – Estas células requerem um anexo para o crescimento. As células aderentes são geralmente derivadas de tecidos de órgãos, por exemplo, do rim, onde as células são imóveis e embutidas no tecido conjuntivo
Células Independentes de Ancoragem ou Células de Suspensão – Estas células não requerem um anexo para crescimento. Em outras palavras, essas células não se ligam à superfície do vaso de cultura. Todas as culturas em suspensão são derivadas de células do sistema sanguíneo; por exemplo, linfócitos de glóbulos brancos são suspensos no plasma
As células derivadas de culturas primárias têm um tempo de vida limitado. As células não podem ser mantidas indefinidamente devido a vários motivos. O aumento do número de células na cultura primária levará à exaustão de substrato e nutrientes. Além disso, a atividade celular aumentará gradualmente o nível de metabólitos tóxicos na cultura, inibindo ainda mais o crescimento celular.
Nesta fase, uma secundária ou uma subcultura deve ser realizada para garantir o crescimento celular contínuo.
O que é Cultura de Células Secundárias?
Como descrito acima, quando as células em culturas aderentes ocupam todo o substrato disponível ou quando as células em culturas em suspensão ultrapassam a capacidade do meio para suportar mais crescimento, a proliferação celular começa a reduzir ou cessar completamente. A fim de manter a densidade celular ideal para o crescimento contínuo e estimular a proliferação adicional, a cultura primária deve ser subcultivada. Este processo é conhecido como cultura de células secundárias.
Durante a cultura de células secundárias, as células da cultura primária são transferidas para um novo recipiente com meio de crescimento fresco. O processo envolve a remoção do meio de crescimento anterior e a dissociação das células aderidas em culturas primárias aderentes. A cultura de células secundárias é periodicamente necessária para fornecer às células espaço de crescimento e nutrientes frescos, prolongando assim a vida das células e expandindo um número de células na cultura.
A cultura secundária de um certo volume de uma cultura primária em um volume igual de meio de crescimento fresco permite a manutenção a longo prazo das linhas celulares. A cultura secundária em um volume maior de meio de crescimento fresco é praticada para aumentar o número de células, por exemplo, em processos industriais ou experimentos científicos.
Qual é a diferença entre cultura celular primária e cultura celular secundária?
Como já entendemos os dois termos separadamente, vamos comparar os dois para encontrar outras diferenças entre eles.
Quando Usar Cultura Celular Primária e/ou Secundária
Isso depende do que você quer aprender e do tipo de experimento que você realiza.
Cultura de células primárias: Este é o processo a ser usado para cultivar células do tecido parental em questão. As células em cultura primária terão um tempo de vida finito devido à exaustão de substrato e nutrientes e acúmulo de toxinas, com o crescimento populacional. A cultura primária, apesar das técnicas de separação utilizadas no processo de isolamento, pode conter vários tipos de células. No entanto, isso pode não ser um problema em todos os tipos de experimentos e, nesses casos, a cultura primária sozinha pode ser usada.
Cultura de Células Secundárias: Normalmente, o número de células obtidas da cultura primária é insuficiente em experimentos. A cultura de células secundárias dá a oportunidade de expandir a população de células e também prolongar a vida útil. Permite a seleção adicional de células com o uso de um meio seletivo e permite uniformidade genotípica e fenotípica na população. Este processo é usado para gerar culturas replicadas para caracterização básica, preservação e experimentação.
Semelhança com Tecido Parental
Cultura de células primárias: As células para cultura de células primárias são obtidas diretamente de um tecido animal ou vegetal. Assim, as células em cultura primária se assemelham muito ao seu tecido parental e, portanto, a resposta biológica pode estar mais próxima de uma situação in vivo do que a de uma cultura de células secundária.
Cultura de células secundárias: A cultura de células secundárias se origina de uma cultura de células primárias. Embora a subcultura prolongue a vida útil das células, existe a possibilidade de que, após algumas fases, as células possam ser transformadas ou perder o controle de não se dividir mais do que um certo número de vezes. Isso pode ser devido a mutações ou alterações genéticas em células primárias durante a subcultura. Por exemplo, alguns microorganismos tendem a se adaptar às condições de cultura, que na maioria das vezes são diferentes de seu ambiente natural, alterando sua biologia.
Processo de Cultivo – Obtenção de Células
Cultura de células primárias: Na cultura de células primárias, o tecido animal ou vegetal passará por fases de lavagem, dissecção e desagregação mecânica ou enzimática. O tecido desagregado conterá uma variedade de tipos de células diferentes, e isso pode exigir a adoção de uma técnica de separação para isolar as células de interesse.
Cultura Celular Secundária: Na cultura celular secundária, se a cultura primária for uma cultura aderente, o primeiro passo é separar as células do anexo (superfície do vaso de cultura) por meios mecânicos ou enzimáticos. Em seguida, as células devem ser separadas umas das outras para formar uma única suspensão de células.
Número de células em cultura
Cultura de células primárias: Não é desejável ter uma suspensão absoluta de uma única célula, pois muitas células primárias sobrevivem melhor em pequenos aglomerados.
Cultura de células secundárias: É suficiente gerar uma única suspensão de células.
Vida da Cultura
Cultura de células primárias: As culturas de células primárias têm tempos de vida finitos. Como explicado acima, isso ocorre porque o crescimento das células esgota o substrato e os nutrientes e leva ao acúmulo de metabólitos tóxicos. Como resultado, gradualmente a taxa de crescimento das células cai, levando à morte das células.
Cultura de células secundárias: A cultura de células secundárias prolonga a vida útil das células. A subcultura periódica pode produzir células imortais através da transformação ou alteração genética de células primárias.
Risco de Contaminação
Cultura de células primárias: As culturas de células primárias são mais difíceis de cuidar. Geralmente, as culturas de células primárias precisam de uma rica mistura de aminoácidos, micronutrientes, certos hormônios e fatores de crescimento. Como resultado, o risco de contaminação em culturas de células primárias é maior do que em culturas de células secundárias.
Cultura de células secundárias: As culturas de células secundárias são comparativamente fáceis de manter e o risco de contaminação é menor do que as culturas de células primárias.
Neste artigo, tentamos entender os termos cultura de células primárias e cultura de células secundárias, seguidos de uma comparação para destacar as principais diferenças entre eles. A diferença básica está em como as células são derivadas da cultura; as células para cultura celular primária são obtidas diretamente de um tecido animal ou vegetal, enquanto as células para cultura celular secundária são obtidas de uma cultura primária já estabelecida.
