A principal diferença entre o micronúcleo e o ensaio do cometa é que o ensaio do micronúcleo é importante para verificar danos cromossômicos como consequência da exposição ao mutagênico, enquanto o ensaio do cometa é importante para detectar danos primários no DNA em células individuais.
Os ensaios de genotoxicidade ajudam a avaliar as possibilidades de mutações e anormalidades cromossômicas. As genotoxinas incluem substâncias químicas e radiação. Carcinógenos, mutagênicos e teratógenos são as principais categorias de genotoxinas. Eles causam vários danos, como mutações pontuais, deleções, quebras de fita simples e dupla, aberrações cromossômicas, formações de micronúcleos, reparo de DNA e interações do ciclo celular. Tais condições podem levar a uma ampla variedade de doenças, e os ensaios de genotoxicidade previnem o dano potencial dessas condições. O ensaio de micronúcleo e o ensaio cometa são duas técnicas sob ensaios de genotoxicidade.
O que é Ensaio de Micronúcleos?
O ensaio de micronúcleos é um ensaio para avaliar danos cromossômicos como consequência da exposição a mutagênicos. É importante na triagem de produtos químicos que causam a formação de fusos e micronúcleos. Um ensaio de micronúcleo fornece informações sobre a estabilidade de produtos químicos ao interferir na estrutura e função do cromossomo. Muitos carcinógenos são positivos em ensaios de micronúcleos. O processo de ensaio envolve um tratamento químico e medição da frequência de células micronucleadas. Se houver um aumento anormal no número de células de micronúcleos, conclui-se que o produto químico induz danos cromossômicos.
Um ensaio de micronúcleo é geralmente realizado em células em divisão ativa. Portanto, eritrócitos e células-tronco da medula óssea produzidos por meio de divisões celulares são candidatos ideais para tais ensaios. Eles experimentam uma rotatividade constante e rápida. Como os eritrócitos não têm núcleo verdadeiro, as células micronucleadas ficam mais visíveis ao final do ensaio.
Figura 01: Observação do Ensaio de Micronúcleos
Os ensaios de micronúcleos são econômicos, rápidos, convenientes e exigem menos habilidades para serem executados. Eles refletem aberrações cromossômicas rapidamente de maneira confiável e são extremamente úteis para avaliar rapidamente os danos cromossômicos. Um tipo especial e versátil de ensaio de micronúcleo é o ensaio de citoma de micronúcleo em bloco de citocinese (CBMNcyt). É o ensaio preferível para medir o dano cromossômico e a instabilidade nas células. No entanto, o principal problema do uso do ensaio de micronúcleos é que ele é incapaz de determinar diferentes tipos de aberrações cromossômicas, e o ensaio tem influência na taxa mitótica e na proporção de morte celular, fazendo com que os resultados sejam alterados.
O que é o Ensaio do Cometa?
O ensaio do cometa, também conhecido como ensaio de eletroforese em gel único, é uma técnica simples e sensível para detectar danos no DNA. Ele mede as quebras de DNA em células eucarióticas e é uma técnica padrão para testes de biomonitoramento e genotoxicidade.
O ensaio do cometa está envolvido no encapsulamento de células em suspensões de agarose de baixo ponto de fusão, lise de células em condições neutras ou alcalinas e eletroforese de células lisadas em suspensão. Durante o processo de encapsulamento, as células são suspensas em agarose fundida de baixo ponto de fusão, e a agarose forma uma matriz de fibras de carboidratos para fixá-las no lugar. Agarose é osmoticamente neutra; portanto, permite que as soluções penetrem no gel e afetem as células sem perturbá-las e deslocá-las. A solução de lise é uma solução salina aquosa altamente concentrada e um detergente. Este sal interrompe as proteínas e os padrões de ligação dentro da célula enquanto interrompe o conteúdo de RNA da célula. As células destroem, e todas as proteínas, RNA, constituintes citoplasmáticos e nucleoplasmáticos, rompem-se e difundem-se na matriz de agarose, deixando o DNA.
Figura 02: Ensaio do Cometa
A solução de eletroforese é uma solução alcalina onde a dupla hélice do DNA se desnatura e o nucleoide se torna uma fita simples. Durante este processo, um campo elétrico é aplicado para analisar as imagens. A análise da imagem mede a intensidade geral da fluorescência para o DNA e o nucleóide e compara os dois. A estrutura geral se assemelha a um cometa com uma cabeça circular correspondente ao DNA intacto restante e uma cauda para o DNA danificado. Quanto mais brilhante e longa a cauda devido a sinais mais fortes, maior o nível de dano.
Quais são as semelhanças entre o ensaio do micronúcleo e do cometa?
- Micronucleus e o ensaio do cometa são econômicos, rápidos, convenientes e exigem menos habilidades.
- Eles são realizados principalmente no DNA.
- Ambos os ensaios ajudam na avaliação de mutações e anormalidades cromossômicas.
- Além disso, ambas as técnicas usam produtos químicos para realizar o procedimento.
Qual é a diferença entre micronúcleo e ensaio de cometa?
O ensaio de micronúcleo é importante na verificação de danos cromossômicos como consequência da exposição a mutagênicos, enquanto o ensaio cometa é importante na detecção de danos primários ao DNA em células individuais. Assim, esta é a principal diferença entre o micronúcleo e o ensaio cometa. Além disso, o ensaio de micronúcleo está bem estabelecido para detectar clastogenicidade e aneugenicidade. O ensaio do cometa é usado como um teste de genotoxicidade para detectar danos primários ao DNA nas células. Além disso, um ensaio de micronúcleo fornece informações sobre a estabilidade de produtos químicos, enquanto um ensaio cometa é uma eletroforese em gel de célula única.
O infográfico abaixo apresenta as diferenças entre micronúcleo e ensaio cometa em forma de tabela para comparação lado a lado.
Resumo – Ensaio Micronúcleo vs Cometa
Os ensaios de genotoxicidade ajudam a avaliar as possibilidades de mutações e anormalidades cromossômicas. O ensaio de micronúcleo e o ensaio cometa são duas técnicas em ensaios de genotoxicidade. O ensaio de micronúcleo avalia os danos cromossômicos como consequência da exposição ao mutagênico. O ensaio cometa é uma técnica simples e sensível para detectar danos no DNA. Portanto, esta é a principal diferença entre o micronúcleo e o ensaio cometa. O ensaio de micronúcleos é importante na triagem de produtos químicos que causam a formação de fusos e micronúcleos. O ensaio cometa está envolvido no encapsulamento de células em suspensões de agarose de baixo ponto de fusão, lise de células em condições neutras ou alcalinas e eletroforese de células lisadas suspensas.
