Diferença chave – Grama vs Cultura
A coloração de Gram é uma técnica de coloração que é realizada para diferenciar as bactérias em dois grupos de acordo com a espessura da camada de peptidoglicano em sua parede celular. A cultura é um método de cultivo e manutenção de microrganismos em condições laboratoriais para diferentes análises. A principal diferença entre a coloração de gramas e a cultura é sua função; gram uma técnica de coloração de bactérias onde a cultura é um método de crescimento e manutenção de microrganismos.
O que é coloração de Gram?
A coloração de Gram é uma importante técnica de coloração diferencial utilizada para identificação bacteriana em Microbiologia. Esta técnica foi introduzida pelo bacteriologista dinamarquês Hans Christian Gram em 1884. A coloração de Gram classifica as bactérias em dois grupos principais: gram-positivas e gram-negativas; estes são muito importantes na classificação e identificação bacteriana. A coloração de Gram é realizada como um passo inicial para a caracterização bacteriana.
As bactérias são agrupadas com base nas diferenças em sua parede celular. As bactérias Gram positivas contêm uma camada espessa de peptidoglicano em sua parede celular, enquanto as bactérias Gram negativas contêm uma camada fina de peptidoglicano em sua parede celular, conforme mostrado na figura 01. O resultado da coloração de Gram será baseado na diferença de espessura na camada de peptidoglicano do parede celular.
Figura 1: Bactérias Gram positivas e Gram negativas
A coloração de Grams é realizada usando quatro reagentes diferentes, a saber; corante primário, mordente, agente descolorante e contra-corante. Cristal violeta e safranina servem como corantes primários e de contraste, respectivamente, enquanto os gramas de iodo e álcool 95% servem como mordente e descolorante, respectivamente.
Etapas básicas da coloração de gramas
- Um esfregaço bacteriano é preparado em uma lâmina de vidro limpa, fixada a quente e resfriada.
- A mancha é inundada com cristal violeta por 1 a 2 minutos.
- Smear é enxaguado com água corrente da torneira para remover o excesso de manchas.
- Gramas de iodo são aplicados no esfregaço por 1 minuto.
- O esfregaço é enxaguado com água corrente da torneira
- O esfregaço é lavado com álcool 95% por 2 a 5 segundos e enxaguado com água corrente da torneira.
- Smear é contra-corado com safranina por 1 minuto
- O esfregaço é enxaguado com água corrente da torneira, seco e observado ao microscópio.
Ao final da coloração de gram, as bactérias gram negativas serão observadas na cor rosa enquanto as bactérias gram positivas serão observadas na cor roxa conforme mostrado na Figura 02. O resultado da coloração de gramas é decidido pela espessura da camada de peptidoglicano em sua parede celular. Durante a etapa de descoloração, o corante primário e o mordente são facilmente removidos das bactérias gram negativas e tornam-se incolores, pois possuem uma fina camada de peptidoglicano. A coloração primária é retida nas bactérias gramas positivas, uma vez que possuem uma camada espessa de peptidoglicano. A contracoloração não será eficaz para bactérias Gram positivas devido à retenção da coloração primária. Assim, as bactérias positivas de gramas serão visíveis na cor primária da mancha, ou seja, na cor roxa. A contracoloração corará as bactérias gram negativas e será visível na cor escolhida, que é a cor safranina. Assim, é fácil categorizar as bactérias em dois grupos pela coloração de Gram e é valioso na diferenciação e identificação bacteriana.
Figura 2: Cepa Gram
O que é Cultura?
A cultura microbiana é um método de cultivo e manutenção de microrganismos em condições laboratoriais para diferentes finalidades. As culturas são cultivadas em meios sólidos, semi-sólidos e líquidos com base no tipo e na finalidade da cultura do microrganismo. As culturas são fornecidas com os nutrientes necessários e as condições de crescimento exigidas pelos microrganismos. Existem diferentes componentes de um meio de cultura, como fonte de energia, fonte de carbono, fonte de nitrogênio, minerais, micronutrientes, água, agente de solidificação, etc. Temperatura ideal, oxigênio e pH devem ser ajustados de acordo com o tipo de microrganismo cultivado.
Existem diferentes tipos de culturas microbianas; por exemplo, cultura em lote, cultura contínua, cultura de esfaqueamento, cultura em placa de ágar, cultura em caldo, etc. De acordo com a composição do meio de cultivo, existem diferentes tipos de meios de cultura conhecidos como meios sintéticos, meios semi-sintéticos e meios naturais. As culturas microbianas são preparadas em condições estéreis dentro de uma câmara especial chamada fluxo de ar laminar. O meio de cultivo e a vidraria são esterilizados antes da inoculação do microrganismo desejado. Sob condições estéreis adequadas, o microrganismo alvo é transferido para o meio nutriente esterilizado e incubado na temperatura ideal. Dentro do meio, o microrganismo crescerá e se multiplicará usando os nutrientes fornecidos.
Figura 3: Uma cultura bacteriana na placa
Qual é a diferença entre Gram Stain e Culture?
Mancha de Gram vs Cultura |
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| A cepa Grams é uma técnica de coloração diferencial usada para diferenciação e identificação bacteriana. | A cultura microbiana é um método de cultivo de microrganismos em laboratório. |
| Componentes | |
| Isso usa reagentes diferentes, incluindo dois corantes. | Isso usa diferentes meios de cultura, como meios sólidos, semi-sólidos e líquidos compostos de nutrientes e outras condições necessárias. |
| Funções Básicas | |
| Isso permite o agrupamento de bactérias em dois grupos: gramas negativas e gramas positivas. | Isso permite a multiplicação de microrganismos para diferentes propósitos. |
| Base | |
| O resultado da coloração de Gram é baseado nas diferenças na camada de peptidoglicano da parede celular. | Os microrganismos crescerão e se multiplicarão dentro do meio de cultura. |
| Resultado | |
| As bactérias Gram negativas são visíveis na cor rosa e as bactérias Gram positivas são visíveis na cor roxa. | Nas placas podem ser observadas colônias de microrganismos. Em meios líquidos, os microrganismos estão em forma suspensa. |
Resumo – Grama x Cultura
Culturas microbianas são preparadas e mantidas em condições de laboratório para diferentes finalidades, como armazenamento, teste, purificação química, etc. A coloração de Grams é um procedimento de coloração que diferencia as bactérias em dois grupos principais chamados bactérias gramas negativas e bactérias gramas positivas. Portanto, a diferença entre a coloração de gramas e a cultura é que a coloração de gramas é uma técnica de coloração de bactérias enquanto a cultura é um método de cultivo e manutenção de microrganismos nos laboratórios.
