Eletroforese vs Eletroosmose
Métodos de separação física como filtragem, destilação, cromatografia em coluna não são métodos fáceis quando se trata de separação de algumas moléculas. A eletroforese e a eletro-osmose são duas outras técnicas de separação que podem ser usadas para separar partículas carregadas.
O que é Eletroforese?
Eletroforese é uma técnica de separação de moléculas com base em seus tamanhos. Fundamental para esta separação é a carga da molécula e sua capacidade de se mover em um campo elétrico. Esta é a técnica mais comum e principal em biologia molecular para separar moléculas, especialmente DNA e proteínas. Isso é usado principalmente porque é relativamente fácil e barato. O aparato para a eletroforese pode ser um pouco complicado e sua preparação leva algum tempo. Mas podemos facilmente fazer um aparelho de eletroforese com as coisas que temos no laboratório. As técnicas de eletroforese podem variar dependendo de nossos propósitos. Podemos usar eletroforese unidimensional para a separação de DNA ou proteína. A eletroforese bidimensional é usada quando são necessárias amostras mais resolvidas (como no caso da impressão digital). Um gel é usado como meio de suporte para separar as moléculas. Este gel pode ser preparado como folhas planas ou em tubos. A base deste procedimento é separar as moléculas dependendo de sua taxa de movimento através de um gel quando um campo elétrico é fornecido. Moléculas carregadas negativamente, como o DNA, tendem a viajar para o pólo positivo neste campo elétrico, enquanto moléculas carregadas positivamente tendem a viajar para o pólo negativo. Dois tipos de géis são usados na eletroforese como agarose e poliacrilamida. Estes dois têm diferentes poderes de resolução. O gel atua como uma peneira para filtrar os diferentes tamanhos de moléculas. As cargas eletrostáticas instaladas no gel atuam como força.
A separação depende da mobilidade dos íons.
F=fv=ZeE
V=ZeE/f
F=força agindo sobre uma partícula
f=coeficiente de atrito
V=velocidade média de migração
Z=carga da partícula migratória
e=carga elementar
E=intensidade do campo elétrico
As condições necessárias para a eletroforese são relativamente simples. Ao fazer o gel e executar a amostra, um tampão é usado. Marcadores e corantes são usados para fins de visualização.
O que é Eletro-osmose?
Este é o processo de mover um líquido através de um material usando um campo elétrico aplicado. O movimento pode ser através de um material poroso, ao longo de um capilar, membrana etc. Isso pode ser usado como uma técnica de separação (especialmente eletro-osmose capilar). A velocidade do líquido é linearmente proporcional ao campo elétrico aplicado. Depende também do material utilizado para construir o canal e da solução utilizada. Na interface, solução e material obtiveram cargas opostas e isso é conhecido como dupla camada elétrica. Quando um campo elétrico é aplicado à solução, a dupla camada elétrica se move pela força de Coulomb resultante. Isso é conhecido como fluxo eletro-osmótico.
Qual é a diferença entre Eletroforese e Eletro-osmose?
• Na eletroforese, partículas sólidas (macromoléculas como ácidos nucléicos ou proteínas) são movidas usando um campo elétrico. Mas na eletro-osmose um líquido está se movendo.
• Na eletroforese, o material sólido de suporte é um gel. Mas na eletro-osmose pode ser um gel, membrana, capilar, etc.
