A principal diferença entre radioimunoensaio e imunorradiometria é que, no radioimunoensaio, a amostra ou composto a ser medido é combinado com um antígeno radioativo antes da combinação, enquanto que no ensaio imunorradiométrico, a amostra ou composto combina imediatamente com o radiomarcado anticorpos.
Um imunoensaio é um teste bioquímico que detecta a presença ou concentração de macromoléculas em uma solução usando um anticorpo ou antígeno. Anticorpos fluorescentes e radioativos são usados para medir antígenos em uma amostra. Inicialmente, anticorpos foram utilizados em técnicas de precipitação como imunoprecipitação, imunodifusão e imunoeletroforese para análise de proteínas séricas. Atualmente, técnicas altamente sensíveis, como radioimunoensaio e ensaios imunorradiométricos, são usadas para a medição de medicamentos, marcadores tumorais e hormônios.
O que é Ensaio de Radioimunoensaio?
Radioimunoensaio (RIA) é um imunoensaio que utiliza elementos radioativos na formação gradual de complexos antígeno-anticorpo. A RIA geralmente usa anticorpos radioativos para detectar a quantidade de antígeno em uma amostra. RIA é um ensaio in vitro muito específico e altamente sensível. O princípio por trás da RIA é a vinculação competitiva. Aqui, um antígeno radioativo compete contra um antígeno não radioativo por uma quantidade constante de anticorpos ou sítios de ligação ao receptor. A RIA requer licenciamento e precauções especiais, pois são usadas substâncias radioativas e permanece entre as técnicas menos dispendiosas.
Figura 01: Imunoensaio
Durante RIA, uma quantidade conhecida de antígeno torna-se radioativa com frequência, rotulando-a com isótopos gama-radioativos de iodo ligados à tirosina. Então este antígeno é combinado com uma quantidade conhecida de anticorpo. Aqui, tanto o antígeno quanto o anticorpo se ligam especificamente um ao outro. Em seguida, uma amostra de soro sanguíneo é adicionada para iniciar uma reação competitiva entre os antígenos marcados e os antígenos não marcados no soro com anticorpos específicos. Nesta reação, os anticorpos liberam uma certa quantidade de antígeno marcado. Esta quantidade é proporcional à proporção de antigénio marcado para antigénio não marcado. Finalmente, uma curva de ligação é gerada para derivar a quantidade de antígeno no soro sanguíneo de um paciente.
O que é Ensaio Imunoradiométrico?
Ensaio imunorradiométrico (IRMA) é um imunoensaio que utiliza anticorpos radiomarcados. Em IRMA, os anticorpos são marcados usando radioisótopos. Esses anticorpos se ligam aos antígenos presentes em uma amostra específica. Em uma amostra positiva, os anticorpos marcados radioativamente se ligam aos epítopos livres dos antígenos. Isso forma um complexo antígeno-anticorpo.
Durante a segunda reação, os anticorpos marcados que não estão ligados são removidos usando um antígeno de fase sólida. O número restante de anticorpos radioativos na solução é uma função direta da concentração do antígeno. IRMA é conhecido como um ensaio de reagente em excesso, onde uma quantidade em excesso de anticorpo radiomarcado é usada como reagente. Aqui, uma concentração excessiva de anticorpo ou antígeno marcado pode reagir. Como etapa final, os anticorpos ligados ao antígeno e os anticorpos livres são separados, e a fração ligada ao antígeno é submetida a ensaios radioativos. Aqui, a atividade da fração é diretamente proporcional à concentração do antígeno.
Quais são as semelhanças entre o Radioimunoensaio e o Ensaio Imunoradiométrico?
- Tanto o radioimunoensaio quanto o ensaio imunoradiométrico são imunoensaios que usam elementos radioativos na formação gradual de complexos antígeno-anticorpo.
- Eles formam um complexo antígeno-anticorpo.
Qual é a diferença entre radioimunoensaio e imunorradiometria?
Radioimunoensaio é um imunoensaio que determina os níveis de anticorpos por um antígeno marcado com um radioisótopo, enquanto o ensaio imunoradiométrico é um ensaio de reagente em excesso que usa uma concentração excessiva de anticorpo radiomarcado. Assim, esta é a principal diferença entre o radioimunoensaio e o ensaio imunorradiométrico. IRMA é capaz de fornecer maior sensibilidade do que RIA. Em RIA, os antígenos são marcados com isótopos de iodo radioativos gama, enquanto em anticorpos IRMA, são marcados usando isótopos de iodo. Então, essa também é uma diferença entre o radioimunoensaio e o ensaio imunorradiométrico. Como IRMA é uma técnica de excesso de reagente, o ensaio é realizado em um tempo menor que o RIA.
A tabela a seguir resume as diferenças entre radioimunoensaio e imunorradiometria.
Resumo – Radioimunoensaio vs Ensaio Imunoradiométrico
Radioimunoensaio é um imunoensaio que usa elementos radioativos em formação gradual para determinar os níveis de anticorpos. RIA geralmente usa anticorpos radioativos. Um antígeno radioativo compete contra um antígeno não radioativo por uma quantidade constante de anticorpos ou sítios de ligação ao receptor. O ensaio imunorradiométrico é um imunoensaio realizado para determinar os níveis de antígeno de uma amostra usando anticorpos radiomarcados. Esses anticorpos se ligam a antígenos presentes em uma amostra específica. Ao final de cada ensaio, um complexo antígeno-anticorpo é formado. Para obter os resultados dos ensaios, é desenhada uma curva de ligação. No radioimunoensaio, a quantidade de antígeno marcado é proporcional à razão do antígeno marcado para o não marcado, mas em um ensaio imunorradiométrico, a atividade da fração ligada ao antígeno é diretamente proporcional à concentração do antígeno. Este é o resumo da diferença entre o radioimunoensaio e o ensaio imunorradiométrico.
