A principal diferença entre RIA e ELISA é que o radioimunoensaio (RIA) é uma técnica de imunoensaio que usa radioisótopos para detectar complexos antígeno-anticorpo, enquanto o ensaio imunoenzimático (ELISA) é uma técnica de imunoensaio que usa enzimas para detectar antígeno -complexos de anticorpos.
A detecção de proteínas específicas, como antígenos, é extremamente importante no diagnóstico de doenças. Portanto, RIA e ELISA são duas técnicas de imunoensaio usadas em laboratórios para detectar rapidamente proteínas específicas, especialmente antígenos. Geralmente, um anticorpo específico se liga ao antígeno alvo e forma um complexo visível conhecido como precipitina. Esses complexos de anticorpos e antígenos podem ser identificados por meio de diferentes técnicas. A técnica de detecção do complexo antígeno-anticorpo usando radioisótopos é conhecida como RIA, e a técnica de detecção do complexo antígeno-anticorpo usando enzimas é conhecida como ELISA.
O que é RIA?
Radioimunoensaio (RIA) é uma técnica de imunoensaio que detecta complexos de antígeno e anticorpo usando radioisótopos. Rosalyn Sussman Yalow desenvolveu esta técnica em 1960 com a ajuda de Solomon Berson. Por esta descoberta notável, Rosalyn Sussman Yalow ganhou o Prêmio Nobel de medicina em 1977. Normalmente, em radioimunoensaio, uma quantidade conhecida de um antígeno é primeiro tornada radioativa. antígenos. Esses radioisótopos normalmente se ligam ao aminoácido tirosina do antígeno. Em seguida, o antígeno radiomarcado é misturado com o anticorpo. Como resultado, o antígeno e o anticorpo radiomarcados se ligam especificamente um ao outro.
Mais tarde, uma amostra de soro que contém uma quantidade desconhecida do mesmo antígeno é adicionada. Isso faz com que o antígeno não marcado do soro compita com o antígeno radiomarcado pelos sítios de ligação do anticorpo. À medida que a concentração de antígeno não marcado aumenta, mais se liga ao anticorpo, deslocando a variante radiomarcada. Assim, reduz a proporção de antigénio marcado radioactivamente ligado ao anticorpo para o antigénio radiomarcado livre. No final do procedimento, os antígenos ligados são separados. Em última análise, a radioatividade de antígenos livres no sobrenadante restante é medida usando um contador gama.
O que é ELISA?
ELISA é uma técnica de imunoensaio que detecta complexos de antígeno e anticorpo usando enzimas. É um ensaio analítico bioquímico descrito pela primeira vez por Engvall e Perlmann em 1971. Na maioria das formas simples de técnicas de ELISA, os antígenos da amostra do paciente são fixados a uma superfície sólida. Em seguida, um anticorpo correspondente é aplicado sobre a superfície, para que possa se ligar ao antígeno.
Figura 01: ELISA
Este anticorpo em particular está ligado a uma enzima. Mais tarde, quaisquer anticorpos não ligados são removidos por lavagem com detergente. Na etapa final desta técnica, o substrato da enzima é adicionado. Se houver uma ligação adequada de antígeno e anticorpo, a reação subsequente produz um sinal de cor detectável, mais comumente uma mudança de cor.
Quais são as semelhanças entre RIA e ELISA?
- RIA e ELISA são técnicas de imunoensaio.
- Ambas as técnicas possuem formação de complexo de antígeno e anticorpo.
- Estas técnicas podem ser usadas para detectar proteínas desconhecidas em amostras.
- Ambos são usados no diagnóstico de doenças em laboratórios.
- Ambas são técnicas altamente específicas e sensíveis.
Qual é a diferença entre RIA e ELISA?
RIA é uma técnica de imunoensaio para a detecção do complexo antígeno-anticorpo usando radioisótopos. ELISA é uma técnica de imunoensaio para a detecção do complexo antígeno-anticorpo usando enzimas. Portanto, esta é a principal diferença entre RIA e ELISA. Além disso, na técnica RIA, o antígeno é marcado, mas no ELISA, o anticorpo é marcado. Além disso, na técnica de RIA, as moléculas de marcação são radioisótopos, enquanto que, em ELISA, as moléculas de marcação são enzimas. Assim, esta é outra diferença entre RIA e ELISA.
O infográfico abaixo mostra mais diferenças entre RIA e ELISA em forma de tabela.
Resumo – RIA vs ELISA
Os imunoensaios desempenham um papel muito importante em vários ambientes bioanalíticos, como diagnósticos clínicos, análises biofarmacêuticas, monitoramento ambiental, biossegurança e testes de alimentos. Desde a década de 1960, uma ampla gama de imunoensaios foi desenvolvida. RIA e ELISA são ambas técnicas de imunoensaio. RIA é uma técnica de imunoensaio para detectar o complexo antígeno-anticorpo usando radioisótopos. ELISA é uma técnica de imunoensaio para detectar o complexo antígeno-anticorpo usando enzimas. Assim, este é o resumo da diferença entre RIA e ELISA.
