Diferença chave – Proteína A vs Proteína G
A purificação de anticorpos IgG, suas subclasses e outros tipos de imunoglobulinas (IgA, IgE, IgD e IgM) tem sido realizada comumente utilizando proteínas bacterianas que possuem alta afinidade para a região Fc desses anticorpos. A proteína A e a proteína G são proteínas recombinantes bacterianas altamente recomendadas para fins de purificação de imunoglobulinas IgG humanas e de outros animais. E também proteína A, proteína G, proteína A/G e proteína L são proteínas recombinantes microbianas nativas que possuem sítios de ligação específicos para a região Fc de anticorpos IgG de mamífero. Além disso, essas proteínas microbianas também podem ser usadas para purificar outros tipos de imunoglobulinas, como IgA, IgE, IgD e IgM em mamíferos e outros animais, como coelho, camundongo, ovelha, vaca, etc. A proteína A se liga a anticorpos humanos diferentes de anticorpo IgG. Mas liga-se fracamente com IgG humana3 subclasse e não se liga com anticorpo IgD humano. A proteína G liga-se a todos os subtipos de anticorpos IgG humanos e é mais versátil quando se liga a anticorpos IgG de outras espécies. No entanto, a proteína G não se liga a outros tipos de anticorpos humanos além de IgG. A proteína G tem uma afinidade maior para a IgG do que a proteína A. Esta é a principal diferença entre a proteína A e a proteína G.
O que é Proteína A?
Proteína A é definida como uma proteína de superfície que tem o tamanho de 42 kDa. A proteína A é originalmente encontrada na parede celular de Staphylococcus aureus. É codificado pelo gene “spa”. A proteína A é regulada pela topologia do DNA, osmolaridade celular e um sistema de dois componentes. Essa proteína recombinante microbiana está altamente envolvida nas reações bioquímicas, devido à sua capacidade de se ligar a vários tipos de anticorpos, como IgG, IgA, IgE e IgM. Assim, esta proteína microbiana é usada para purificar tipos de anticorpos humanos. Possui cinco domínios de ligação “Ig” homólogos que se dobram em feixes de três hélices. Cada domínio é capaz de se ligar a proteínas imunoglobulinas de muitas espécies de mamíferos, principalmente com anticorpos IgG. A proteína A liga-se especificamente à cadeia pesada da região Fc da maioria das imunoglobulinas.
No que diz respeito às proteínas da família VH3 humana, a Proteína A liga-se à região Fab. A proteína A recombinante é mais ampla em sua capacidade de se ligar a outros anticorpos humanos (IgA, IgE, IgM) além do anticorpo IgG. Mas liga-se fracamente com IgG humana3 subclasse e não se liga com anticorpo humano IgD. A proteína A também é capaz de se ligar a anticorpos IgG de outras espécies, como cavalo, coelho, camundongo, cachorro, macaco, vaca etc.
Figura 01: Proteína A
Proteína A desempenha um papel fundamental na patogênese do Staphylococcus aureus. Esta proteína facilita a ligação de bactérias à superfície humana revestida com fator de Von-Willebrand. Assim, está aumentando a eficiência da infecção bacteriana. A proteína A também prejudica a imunidade mediada por humoral humana. Esta proteína recombinante microbiana é produzida através do processo de fermentação industrial.
O que é Proteína G?
Proteína G é definida como a proteína de ligação de imunoglobulina que expressa especificamente por bactérias estreptocócicas dos grupos C e D. Possui alta afinidade para as regiões Fc e Fab dos anticorpos. A proteína G tem aproximadamente 65kDa de tamanho molecular.
Proteína G é uma proteína de superfície. Devido à sua afinidade de ligação às imunoglobulinas, é usado para purificação de anticorpos. A proteína G liga-se a todos os subtipos de anticorpos IgG humanos e é também mais versátil quando se liga a anticorpos IgG de outras espécies. Mas não se liga a outros tipos de anticorpos humanos (IgA, IgE, IgM, IgD). O dobramento dos domínios da proteína G – B1 entre si resulta em uma proteína globular.
Quais são as semelhanças entre a proteína A e a proteína G?
- Ambos são proteínas microbianas.
- Ambos são proteínas recombinantes.
- Ambas as proteínas têm alta afinidade com o anticorpo IgG humano e suas subclasses.
- Ambos são usados para purificação de imunoglobulinas.
- Ambas as proteínas podem se ligar à região Fc das imunoglobulinas.
Qual é a diferença entre Proteína A e Proteína G?
Proteína A vs Proteína G |
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Proteína A é definida como uma proteína de superfície de 42 kDa que é originalmente encontrada na parede celular de Staphylococcus aureus. | Proteína G é definida como uma proteína de ligação de imunoglobulina de superfície de 65kDa que expressa especificamente por bactérias estreptocócicas dos grupos C e D. |
Expressando o tipo bacteriano | |
Proteína A é expressa por Staphylococcus aureus | Proteína G é expressa por bactérias estreptocócicas dos grupos C e D. |
Tamanho Molecular | |
Proteína A tem um tamanho de 42kDa. | Proteína G tem aproximadamente 65kDa de tamanho (proteína G148 G-65kDa e proteína C40 G-58kDa). |
Ligação à albumina do soro humano | |
Proteína A não se liga à albumina sérica. | Proteína G tem sítios de ligação para albumina sérica. |
Purificação de IgG Humana3 Subclasse | |
Proteína A não pode ser usada para purificação da subclasse IgG humana3, pois não se liga à imunoglobulina humana IgG3 subclasse imunoglobulina. | Proteína G pode ser usada para purificação da subclasse IgG humana3, pois está se ligando à imunoglobulina da subclasse IgG humana3. |
Purificação de outros anticorpos humanos (IgA, IgE e IgM) | |
Proteína A tem uma maior capacidade de se ligar a outros anticorpos humanos que não o anticorpo IgG. Assim, pode ser usado para purificar outros anticorpos humanos como; IgA, IgE e IgM. | Proteína G liga-se a todos os subtipos de anticorpos IgG humanos. Mas a proteína G não se liga a outros anticorpos humanos como; IgA, IgE e IgM. Portanto, não pode ser usado para purificar outros anticorpos humanos, como; IgA, IgE e IgM |
Resumo – Proteína A vs Proteína G
A proteína recombinante microbiana A, proteína G, proteína A/G e proteína L são proteínas bacterianas nativas que possuem sítios de ligação específicos para a região Fc dos anticorpos IgG de mamíferos. A proteína A e a proteína G também possuem sítios de ligação para outros anticorpos IgG de outras espécies. A proteína A e a proteína G são proteínas recombinantes bacterianas altamente recomendadas para fins de purificação de imunoglobulinas IgG humanas e de outros animais. A proteína L tem alta afinidade para as cadeias leves kappa das classes de imunoglobulinas IgG, IgA e IgM. Assim, a proteína L pode ser incorporada para purificar esses tipos de imunoglobulinas em humanos e outras espécies. Industrialmente todas essas proteínas bacterianas estão sendo utilizadas atualmente para purificar imunoglobulinas como; IgG, IgA, IgD, IgE e IgM. Isso pode ser descrito como a diferença entre Proteína A e Proteína G.
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