A principal diferença entre os vetores de inserção e substituição é que o vetor de inserção tem a capacidade de inserir comprimentos moderados de DNA estranho, enquanto o vetor de substituição tem a capacidade de acomodar comprimentos maiores de DNA estranho.
Vetores de fagos são os bacteriófagos usados para clonagem. Existem dois tipos de vetores de fagos; eles são vetor de inserção e vetor de substituição. Além disso, todos os vetores de fagos consistem em genes não essenciais. No entanto, esses genes precisam ser removidos dos fagos para facilitar novas inserções de DNA estranho.
O que é um vetor de inserção?
Primeiro de tudo, o vetor de inserção é a forma mais simples de vetores de clonagem lambda. De fato, é um tipo de vetor fago que possui um único sítio de restrição introduzido no genoma do vetor na posição de DNA opcional. Além disso, o DNA do fago permanece sem remoção. Esta não remoção do DNA do fago reduz o tamanho das inserções (DNA estranho) a serem clonadas dentro do vetor. Além disso, esses vetores são úteis na clonagem e expressão de cDNA. GT10, GT11 e Zap são exemplos desse vetor.
Figura 01: Fago Lambda
O vetor de inserção consiste em um único local de reconhecimento. A função primária deste vetor é desenvolver bibliotecas de cDNA derivadas de sequências de mRNA eucarióticas. Além disso, só pode acomodar comprimentos de DNA estranho variando entre 05-11 kb. Além disso, possui um local de clivagem exclusivo para a inserção de DNA estranho.
O que são vetores de substituição?
Vetor de substituição ou vetor de substituição é um tipo de vetor de fago desenvolvido a partir da remoção de uma região de 'fragmento de enchimento' do DNA do fago. O inserto de DNA estranho desejado substitui o DNA do fago.
Figura 02: Vetor de substituição
Vetores de substituição são importantes na criação de bibliotecas genômicas como EMBL4 e Charon40. Esses vetores podem acomodar um comprimento maior de DNA estranho variando entre comprimentos de 08-24kb. A região de preenchimento também consiste em um gene que torna o vetor fago inviável dentro de um hospedeiro bacteriano.
Quais são as semelhanças entre vetores de inserção e substituição?
- Vetores de inserção e substituição são vetores de fagos.
- Ambos os vetores acomodam inserções de DNA estranho.
- Ambos são úteis na criação de bibliotecas de DNA.
Qual é a diferença entre vetores de inserção e substituição?
Inserção vs Vetores de Substituição |
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| Vetor de inserção é um tipo de vetor de fago que tem um sítio de restrição introduzido dentro do genoma do fago no sítio de DNA opcional. | Vetor de substituição é um tipo de vetor de fago desenvolvido a partir da remoção de uma região de 'fragmento de enchimento' do DNA do fago |
| Tamanho dos Fragmentos de Inserção | |
| 05-11 kb comprimento | 08-24 kb comprimento |
| Fragmento de Preenchimento | |
| Sem fragmento de preenchimento | Fragmento de preenchimento é substituído por uma inserção estrangeira |
| Função | |
| Importante para criar bibliotecas de cDNA | Importante na criação de bibliotecas de genoma |
| Exemplos | |
| GT10, GT11 e Zap são exemplos | EMBL4 e Charon40 são exemplos |
| Sítio de Clivagem | |
| Um local de clivagem único está presente | Sítio de clivagem contém genes que não são essenciais para o ciclo lítico |
Resumo – Vetores de Inserção vs Substituição
Os vetores de inserção e substituição são dois tipos de vetores fagos. Ambos os vetores têm sítios de restrição que facilitam a acomodação de novas inserções de DNA estranho. Os vetores de inserção são importantes na criação de bibliotecas de cDNA, enquanto os vetores de substituição são importantes na criação de bibliotecas genômicas. Além disso, os vetores de inserção acomodam inserções de DNA com um comprimento moderado. Mas os vetores de substituição podem acomodar comprimentos maiores de inserções de DNA estranho. No geral, essa é a principal diferença entre os vetores de inserção e substituição.
