Key Difference – Vetores YAC vs BAC
Vetores são usados na clonagem molecular. Um vetor pode ser definido como uma molécula de DNA que se comporta como um veículo para transportar material genético estranho para outra célula. Um vetor contendo DNA estranho é conhecido como DNA recombinante e deve ter a capacidade de replicá-lo e expressá-lo no organismo hospedeiro. O cromossomo artificial de levedura (YAC) e o cromossomo artificial bacteriano (BAC) são dois tipos de vetores envolvidos na clonagem. A principal diferença entre YAC e BAC é que YAC é um sistema de vetor construído artificialmente usando uma região específica do cromossomo de levedura para inserir grandes segmentos de materiais genéticos em células de levedura, enquanto o BAC é um sistema de vetor construído artificialmente usando uma região específica de E.coli para inserir grandes segmentos de DNA em células de E. coli.
O que são vetores YAC?
YAC (cromossomo artificial de levedura) é um cromossomo construído artificialmente que tem a capacidade de transportar um grande segmento de DNA estranho e replicar dentro das células de levedura. Possui um centrômero, telômeros e sequências de replicação autônoma que são essenciais para a replicação e estabilidade. YAC também deve conter um marcador ou marcadores seletivos e locais de restrição para torná-lo um vetor de clonagem eficaz. Uma grande sequência variando de 1.000 kb a 2.000 kb pode ser inserida em YAC e transferida para levedura. A eficiência de transformação do YAC é muito baixa.
Figura 01: Vetor YAC
O que são vetores BAC?
Cromossomo artificial bacteriano (BAC) é um cromossomo construído artificialmente para clonagem molecular. Possui regiões específicas do plasmídeo F de E. coli e é circular e superenrolado. BAC é desenvolvido para clonar fragmentos de DNA para bactérias, especialmente para E. coli. Pode conter fragmentos de DNA com tamanhos de até 300 kb. Em comparação com YAC, as inserções de clonagem BAC são menores em tamanhos. Os BACs foram desenvolvidos em 1992 e ainda são populares devido à sua estabilidade e facilidade de construção. BACs também são úteis no desenvolvimento de vacinas.
Figura 02: Vetor BAC na clonagem molecular
Qual é a diferença entre vetores YAC e BAC?
YAC vs BAC Vetores |
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| YAC é um cromossomo geneticamente modificado com o uso de DNA de levedura para fins de clonagem. | BAC é uma molécula de DNA geneticamente modificada usando DNA de E. coli para fins de clonagem. |
| Gênero | |
| YACs foram projetados para clonar grandes fragmentos de DNA genômico em leveduras. | BACs foram desenvolvidos para clonar grandes fragmentos genômicos em Escherichia coli. |
| Inserir Comprimento | |
| YACs podem conter inserções genômicas de tamanho megabase.(1000 kb – 2000 kb). | BACs podem carregar inserções de 200–300 kb ou menos. |
| Construção | |
| YAC DNA é difícil de purificar intacto e requer alta concentração para gerar o sistema de vetor YAC. | BAC é fácil de purificar intacto e pode ser facilmente construído. |
| Quimerismo | |
| YACs geralmente são quiméricos. | BACs raramente são quiméricos. |
| Estabilidade | |
| YAC é instável. | BAC é estável. |
| Modificações | |
| A recombinação de levedura é muito viável e sempre permanece ativa. Portanto, ele pode gerar exclusões e outros rearranjos em um YAC. | E. coli recombinação é impedida e é ativada quando necessário. Portanto, reduz os rearranjos indesejados em BACs. |
| Manutenção | |
| Manipulação de YACs recombinantes geralmente requer que YAC seja transferido para E. coli para manipulação subsequente. Portanto, é um processo trabalhoso. | A modificação BAC ocorre diretamente em E. coli. Portanto, não há necessidade de transferência de DNA. Portanto, o processo não é trabalhoso. |
Resumo – Vetores YAC vs BAC
YAC tornou-se uma ferramenta de pesquisa essencial em processos de clonagem devido à sua capacidade de clonar grandes fragmentos de DNA no organismo hospedeiro. No entanto, os YACs têm várias desvantagens como vetores, como dificuldades de construção, quimerismo, instabilidade, etc. Portanto, para superar esses problemas, os cientistas desenvolveram vetores BAC. BAC foi construído usando regiões específicas do cromossomo E. coli. É um vetor estável e pode ser facilmente construído. No entanto, o comprimento do DNA que o BAC pode manipular é até 20 vezes menor que o do YAC. Esta é a diferença entre os sistemas vetoriais YAC e BAC. Atualmente, o BAC é mais preferido do que o YAC nos laboratórios.
