Key Difference – Transfecção Transitória vs Estável
Transfecção é um processo que está envolvido na transferência de genes de células eucarióticas usando métodos químicos ou físicos. A transfecção pode ser classificada em dois tipos principais denominados transfecção transitória e transfecção estável. Durante a transfecção transitória, o gene de interesse não se integra ao genoma do hospedeiro e é expresso temporalmente no hospedeiro por um curto prazo, enquanto, na transfecção estável, o gene de interesse se integra ao genoma do hospedeiro e é mantido por um longo prazo em várias gerações.. Esta é a principal diferença entre transfecção transitória e estável. Em ambos os casos, a transfecção é bem-sucedida e os genes são expressos.
O que é Transfecção Transitória?
A transfecção é uma ferramenta importante para inserir genes em células eucarióticas. Entre os dois tipos de transfecção, a transfecção transitória é uma forma comum de transferência de genes. Através de um vetor, genes estranhos são transformados dentro das células hospedeiras. Uma vez que o DNA estranho entra na célula hospedeira, ela tem duas opções. Ele pode se integrar ao genoma do hospedeiro e se replicar, ou permanecer no interior sem se integrar ao genoma. A transfecção transitória exibe a expressão temporária dos genes inseridos sem integração no genoma do hospedeiro. Os genes expressam e produzem a proteína codificada até a célula se dividir. No entanto, devido à incapacidade de integração, não pode se replicar e entrar nas gerações futuras. Este tipo de transfecção é bem sucedido por um curto período de tempo. Durante a divisão celular ou devido a alguns outros fatores, o DNA estranho é submetido à degradação. A transfecção transitória é mostrada quando o DNA estranho está na forma de DNA altamente enrolado.
Figura 01: Transfecção Transitória
O que é Transfecção Estável?
Transfecção estável mostra integração bem sucedida de genes estranhos no genoma do hospedeiro. Uma vez que o DNA estranho entra na célula hospedeira, parte do DNA estranho se integra ao genoma do hospedeiro e se torna parte dele. Assim, o DNA estranho também se replica e passa para as gerações futuras quando o genoma do hospedeiro se replica. Este tipo de transfecção é complexo e raro. No entanto, devido à transfecção estável no genoma, essa característica é mantida por um longo período de várias gerações.
A transfecção estável é um processo difícil e requer uma entrega eficaz de DNA e a aquisição celular do DNA estranho em seu genoma. Assim, o DNA linear favorece a transfecção estável do que o DNA circular. No entanto, a taxa de transfecção estável é de aproximadamente um em 104 células transformadas. A transfecção estável pode ser observada pela cotransformação de um marcador selecionável e pela realização da seleção artificial em um meio.
Figura 02: Transfecção Estável
Qual é a diferença entre Transfecção Transitória e Estável?
Transfecção Transitória vs Estável |
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| DNA estranho não se integra ao genoma do hospedeiro. | DNA Estrangeiro integra-se ao genoma do hospedeiro e torna-se parte dele. |
| Replicação dentro do Host | |
| Os genes transfectados transitoriamente não se replicam no hospedeiro. Portanto, os genes não são passados para as próximas gerações. | Os genes são replicados dentro do hospedeiro e passados para as gerações futuras. |
| Tempo de duração da expressão gênica | |
| Os genes são expressos por um período de tempo finito e depois disso são destruídos. | Os genes se tornam parte do genoma e se expressam dentro da geração por um longo período de tempo. |
| Usar | |
| Isto é útil para estudar os efeitos da expressão de genes ou produtos de genes a curto prazo. | Isto é útil para estudar os efeitos das expressões gênicas a longo prazo. |
| Detecção da Transfecção | |
| Os genes são expressos e podem ser facilmente detectados pela inserção de um gene repórter. | A transfecção estável pode ser facilmente detectada inserindo um marcador selecionável e selecionando por meio de seleção artificial na mídia. |
| Ocorrência e Processo | |
| A transfecção transitória é comum e não é complexa de realizar. | A transfecção estável é rara e complexa de realizar. |
| Natureza do DNA | |
| DNA altamente superenrolado são adequados para transfecção transitória. | DNA linear são adequados para transfecção estável. |
| Aplicativos | |
| Isso é usado para estudos de knockdown ou silenciamento de genes com RNAs inibitórios, produção de proteínas em pequena escala | Isso é usado para a produção de proteínas em larga escala, estudos de farmacologia de longo prazo, terapia genética, pesquisa sobre os mecanismos de regulação genética de longo prazo |
Resumo – Transfecção Transitória vs Estável
Transfecções transitórias e estáveis são dois tipos de transfecções mostradas durante a transferência de genes para células eucarióticas por sistemas não virais. O DNA estranho transformado não é integrado ao genoma do hospedeiro na transfecção transitória enquanto se integra ao genoma do hospedeiro na transfecção estável. O DNA enrolado circular é mostrado como transfecção transitória, enquanto o DNA linear prefere a transfecção estável. Esta é a diferença entre transfecção transitória e estável. No entanto, a transfecção transitória é mais comum e fácil em comparação com a transfecção estável. Mas a seleção de um entre dois depende do propósito da transferência do gene e da duração do projeto de pesquisa.
