Transformação vs Transfecção
Transformação e transfecção são duas técnicas simples usadas para introduzir um gene estranho em uma célula hospedeira. No entanto, essas técnicas dependem do tipo de sistema hospedeiro ou vetor.
O que é Transformação Celular?
Transformação é a técnica empregada para introduzir genes em leveduras e células bacterianas. Essa técnica geralmente causa alterações hereditárias nos genes e, portanto, a expressão do gene é permanente. A transformação bacteriana foi introduzida pela primeira vez em 1928 por Frederick Griffith. Então, no início da década de 1970, essa técnica foi usada em E.coli. Durante o processo de transformação de E. coli, as células são embebidas em solução gelada de CaCl2 Esta etapa torna as células de E. coli competentes. Depois disso, as células competentes são misturadas com o DNA plasmidial e são incubadas em gelo por 20-30 min. Em seguida, um choque térmico curto é dado para permitir a transferência de DNA para a célula. Finalmente, as células são colocadas em um caldo nutriente e incubadas a 37°C por 60-90 min para estabelecer os plasmídeos. Uma vez que essas etapas sejam concluídas com sucesso, as células transformadas podem ser colocadas em um meio adequado para propagação de células. Como a transformação é considerada uma técnica ineficiente, não pode ser utilizada para preparação de bancos de clones.
O que é Transfecção Celular?
A transfecção é um método de introdução de um gene estranho, geralmente, em células de mamíferos. Existem dois métodos de transfecção; nomeadamente, transfecção transitória e transfecção estável. Na transfecção transitória, a expressão gênica está disponível por tempo limitado; assim, a alteração do gene causa expressão temporária. Este método de transfecção é simples e rápido; portanto, pode ser usado rotineiramente. Uma desvantagem da transfecção transiente é a dificuldade de aplicação para sistemas de síntese de proteínas em larga escala.
Durante a transfecção estável, um gene alvo é integrado ao genoma da célula hospedeira e, portanto, a expressão do gene é permanente, ao contrário da transfecção transitória.
Qual é a diferença entre Transformação e Transfecção?
• A transformação é a introdução de um gene em uma célula procariótica (bacteriana e de levedura), enquanto a transfecção é geralmente chamada de introdução de um gene em uma célula de mamífero.
• A transformação resulta em alteração hereditária, nos genes, enquanto a transfecção pode resultar em expressão temporária ou alterações permanentes nos genes.
