A principal diferença entre GFP e EGFP é que a GFP é uma proteína do tipo selvagem incorporada na clonagem molecular de células de não-mamíferos, enquanto a EGFP é um tipo melhorado ou modificado de GFP que pode ser usado em células de mamíferos.
A clonagem molecular é uma técnica avançada que os cientistas usam imensamente na expressão de proteínas via tecnologia recombinante. Na tecnologia de DNA recombinante, é necessário transformar o vetor recombinante com sucesso no organismo hospedeiro. Assim, durante o processo de transformação, deve-se identificar e confirmar se o gene de interesse foi ou não transformado no hospedeiro. Para avaliar isso, os biólogos moleculares adotam várias técnicas. Dessas técnicas, uma é o gene repórter. Esses genes repórteres atuam como marcadores selecionáveis para selecionar os transformantes corretos. Assim, a Proteína Verde Fluorescente (GFP) e a Proteína Verde Fluorescente Aprimorada (EGFP) são duas proteínas repórter usadas na clonagem molecular.
O que é GFP?
GFP é uma proteína do tipo selvagem que contém 238 resíduos de aminoácidos e várias regiões selecionáveis de sequências de aminoácidos que a distinguem das outras proteínas fluorescentes. Além disso, esta proteína de tipo selvagem estava originalmente isolada de Aequorea Victoria; um tipo de medusa. No entanto, em fenômenos naturais, a água-viva foi capaz de produzir fluorescência de cor verde em resposta a certos estímulos.
Anteriormente, esse conceito surpreendeu os cientistas, e eles decidiram usá-lo em suas tecnologias de DNA recombinante. Consequentemente, os cientistas usaram essa forma mutante do gene do tipo selvagem como um gene repórter em seus estudos de expressão gênica. O gene de tipo selvagem de GFP é capaz de produzir uma proteína que dá fluorescência à temperatura ambiente ou sob luz UV. Portanto, quando inserido nos transformantes, expressa e produz fluorescência. Se a fluorescência resultar após o processo de transformação, confirma o sucesso do processo de transformação. Em palavras simples, a emissão de fluorescência sinaliza a transformação bem sucedida do vetor que carrega o gene de interesse no hospedeiro.
Figura 01: GFP
Por esse motivo, a GFP atua como um marcador in vivo da expressão gênica. Atualmente, técnicas de engenharia genética estão em uso para produzir GFP. Além disso, muitas versões aprimoradas do GFP, como o EGFP, estão disponíveis. Portanto, isso permite o uso eficiente da GFP em estudos de clonagem molecular e expressão gênica.
O que é EGFP?
Enhanced Green Fluorescent Protein ou EGFP é uma versão melhorada da GFP. Em palavras simples, podemos definir EGFP como uma versão projetada de GFP de tipo selvagem. Quando o gene do tipo selvagem da GFP sofre mutação, produz efeitos benéficos. Assim, o gene mutado da GFP permite a expressão de novos caracteres e, como resultado, podemos produzir GFP aprimorada com características aprimoradas. Além disso, podemos introduzir mutações com sucesso no gene GFP de tipo selvagem usando irradiação ou métodos químicos. Esses genes mutantes produzem então o EGFP, que tem características mais benéficas.
Figura 02: EGFP
As características melhoradas do EGFP são as seguintes;
- Capaz de emitir sinais de fluorescência mais fortes.
- Tem alta sensibilidade.
- Pode usá-lo em células de mamíferos em vez de procariontes e outros eucariotos de nível inferior.
- Além disso, proporciona maior pureza do produto.
Portanto, em comparação com GFP, EGFP é a escolha preferida para estudos de expressão gênica. No entanto, o produto é mais caro em comparação ao GFP.
Quais são as semelhanças entre GFP e EGFP?
- GFP e EGFP são duas proteínas que têm a capacidade de emitir cor verde
- Portanto, ambas funcionam como proteínas repórteres em estudos de expressão gênica.
- Além disso, é possível sintetizar ambos usando tecnologia de DNA recombinante.
- Além disso, é fácil modificar ainda mais esses dois tipos para sintetizar formas aprimoradas.
Qual é a diferença entre GFP e EGFP?
O gene repórter é um gene que se liga ao gene de interesse na tecnologia de DNA recombinante. Ele sinaliza a transformação bem sucedida do vetor recombinante para o hospedeiro. Aqui, GFP e EGFP são dois tipos de proteínas fluorescentes verdes que funcionam como proteínas repórter. No entanto, a principal diferença entre GFP e EGFP é que o GFP é um tipo selvagem, enquanto o EGFP é uma versão projetada do GFP. Além disso, EGFP tem características mais benéficas do que GFP. Por exemplo, EGFP produz luz fluorescente mais forte e é mais sensível que o GFP. Outra diferença entre GFP e EGFP são os sistemas em que podemos usá-los. Sistemas não mamíferos usam GFP enquanto sistemas mamíferos usam EGFP.
O infográfico abaixo apresenta a diferença entre GFP e EGFP em forma de tabela.
Resumo – GFP vs EGFP
GFP e EGFP são proteínas repórteres em estudos de clonagem molecular e expressão gênica. GFP é a proteína do tipo selvagem, que é uma proteína verde fluorescente. A proteína foi inicialmente isolada da água-viva Aequorea victoria. Em contraste, EFGP é uma forma melhorada de proteína GFP. É um mutante do tipo selvagem com características melhoradas. Assim, o EFGP tem a maior intensidade de sinal e maior sensibilidade. Portanto, podemos usá-lo em vetores de mamíferos. Em contraste, o uso de GFP é principalmente apenas em vetores não mamíferos. No geral, esta é a diferença entre GFP e EGFP.
