A principal diferença entre as enzimas de restrição EcoRI e HindIII é que EcoRI é uma enzima de restrição tipo II que é isolada de E. coli, enquanto HindIII é uma enzima de restrição tipo II que é isolada de Haemophilus influenza.
Enzima de restrição ou endonuclease de restrição é uma enzima que cliva o DNA em fragmentos em locais de reconhecimento específicos (locais de restrição) dentro da molécula de DNA. Essas enzimas de restrição são encontradas em bactérias e archaea. Eles fornecem um mecanismo de defesa contra vírus invasores. As enzimas de restrição são geralmente classificadas em cinco tipos diferentes: tipo I, tipo II, tipo III, IV e tipo V. EcoRI e HindIII são duas enzimas de restrição que pertencem ao grupo das enzimas de restrição do tipo II.
O que são Enzimas de Restrição EcoRI?
EcoRI é uma enzima de restrição do tipo II que é isolada de espécies de E. coli. É uma enzima de restrição que cliva as duplas hélices do DNA em fragmentos em locais específicos. O EcoRI também faz parte do sistema de modificação de restrição. EcoRI foi a primeira enzima que foi originalmente isolada da cepa RY13 da espécie E. coli. É usado como uma enzima de restrição em biologia molecular. EcoRI cria extremidades adesivas de 4 nucleotídeos com saliências de extremidade 5' de AATT. EcoRI corta o DNA na sequência de reconhecimento específica G↓AATTC. Possui a sequência complementar palindrômica de CTTAA↓G. Além disso, esta enzima de restrição pertence à subclasse tipo II P (especificidade palindrômica). Em sua estrutura primária, EcoRI contém o motivo PD. D/EXK em seu sítio ativo, como muitas outras enzimas de restrição.
Figura 01: EcoRI
A enzima de restrição EcoRI é um homodímero de 31 kDa. Ele contém um domínio globular da arquitetura α/β. Cada subunidade contém um laço que se destaca do domínio globular e envolve o DNA quando ligado. Esta enzima pode ser cocristalizada com a sequência que normalmente corta. Além disso, a enzima de restrição EcoRI é usada em uma ampla variedade de técnicas de genética molecular, incluindo clonagem, triagem de DNA e seções de deleção de condições in vitro de DNA.
O que são enzimas de restrição HindIII?
HindIII é uma enzima de restrição do tipo II que é isolada da espécie Haemophilus influenza. Ele cliva a sequência palindrômica de DNA AACCTT na presença do cofator Mg2+ por meio de hidrólise. A clivagem desta sequência particular entre os AA’S (5’A↓ACCTT3’ e 3’TTCGA↓A5’) resulta em saliências 5’ na molécula de DNA chamadas extremidades adesivas. Esta enzima é encontrada em organismos procarióticos como bactérias. As bactérias usam essa enzima como mecanismo de defesa contra vírus, como bacteriófagos.
Figura 02: HindIII
Estruturalmente, HindIII é um homodímero. Ele contém um núcleo estrutural comum composto por quatro folhas β e uma única α hélice, como outros tipos de enzimas de restrição II. A massa molecular desta enzima é de 34,9 kDa. Além disso, HindIII é muito útil em experimentos de ciências biológicas moleculares modernas, como sequenciamento e mapeamento de DNA.
Quais são as semelhanças entre as enzimas de restrição EcoRI e HindIII?
- EcoRI e HindIII são duas enzimas de restrição pertencentes ao grupo de enzimas de restrição tipo II.
- EcoRI e HindIII foram encontrados no início da década de 1970.
- EcoRI e HindIII contêm o motivo da sequência de aminoácidos PD.. D/EXK.
- Ambas as enzimas de restrição realizam clivagem muito específica do DNA.
- Essas enzimas de restrição precisam de Mg2+ como cofator para sua atividade específica.
- Eles produzem pontas pegajosas após o corte do DNA.
- Eles são componentes muito úteis na pesquisa de biologia molecular moderna.
Qual é a diferença entre as enzimas de restrição EcoRI e HindIII?
EcoRI é uma enzima de restrição tipo II que é isolada de espécies de E.coli, enquanto HindIII é uma enzima de restrição tipo II que é isolada de espécies de Haemophilus influenza. Assim, esta é a principal diferença entre EcoRI e HindIII. Além disso, EcoRI corta o DNA na sequência de reconhecimento específica G↓AATTC, enquanto HindIII corta o DNA na sequência de reconhecimento específica A↓ACCTT.
O infográfico abaixo apresenta as diferenças entre EcoRI e HindIII em forma de tabela para comparação lado a lado.
Resumo – Enzimas de Restrição EcoRI vs HindIII
EcoRI e HindIII são duas enzimas de restrição que pertencem à subclasse p tipo II. Eles realizam clivagem muito específica do DNA. EcoRI é uma enzima de restrição tipo II que é isolada de espécies de E. coli, enquanto HindIII é uma enzima de restrição tipo II que é isolada de espécies de Haemophilus influenza. Então, isso resume a diferença entre EcoRI e HindIII.
