A principal diferença entre o teste LAMP e PCR é que o LAMP é realizado em temperatura constante (60-650C) para produzir cópias de DNA por meio de amplificação, enquanto a PCR é conduzida usando uma série de mudanças de temperatura para produzir cópias de DNA através da amplificação.
LAMP e PCR são ambas técnicas de amplificação in vitro usadas para produzir milhares de cópias de DNA. A quantidade de DNA produzida em LAMP é muito maior do que a quantidade produzida em técnicas de PCR como RT-PCR. LAMP é uma técnica mais recente em comparação com a técnica de PCR. Mas é tecnicamente simples e fácil para um cientista treinado atuar em condições de laboratório. Isso o torna uma técnica potencialmente útil para a detecção de COVID-19. No entanto, o RT-PCR é o teste padrão atual para COVID-19. Essas técnicas, embora bem conhecidas por pesquisadores e médicos com experiência em amplificação de DNA, ainda podem ser relativamente desconhecidas para uma comunidade mais ampla.
O que é o teste LAMP?
A amplificação isotérmica mediada por loop (LAMP) para ensaios COVID-19 começa com uma coleta de amostras do nariz ou da garganta usando um cotonete. As amostras também podem ser coletadas usando outros métodos, como muco de tosse forte. Como a técnica de PCR, como o RT-PCR, o RNA viral na amostra é primeiro convertido em DNA, o que permite que ele seja copiado. A reação LAMP é conduzida a temperatura constante (60-650C).
A amplificação do DNA viral incorporando a tecnologia LAMP e reagentes pode ser detectada quando a mistura de reação fica turva devido à produção de “pirofosfato de magnésio”. Essa nebulosidade permite o diagnóstico fácil do COVID-19 por cientistas e médicos. A precisão dos resultados do teste pode ser melhorada usando corantes fluorescentes especiais ou corantes que mudam de cor na mistura de reação. Esses corantes interagem com o DNA viral, e a intensidade da mudança de luz ou cor pode ser medida para fornecer o número aproximado de moléculas de RNA viral que estava inicialmente na amostra.
O que é teste de PCR?
PCR é uma técnica científica muito comum que tem sido amplamente utilizada em pesquisa e medicina por 20-30 anos para detectar DNA. Os testes de PCR são usados diretamente para detectar um antígeno pela detecção de RNA viral. Geralmente, o RNA viral está presente no corpo antes de detectar anticorpos ou apresentar os sintomas da doença. Portanto, um teste de PCR pode dizer se alguém tem ou não o vírus desde o início. Atualmente, o PCR é o teste padrão para detectar o COVID-19. Existem diferentes tipos de técnicas de PCR, como PCR em tempo real, PCR aninhado, PCR multiplex, PCR de inicialização a quente e PCR de longo alcance, etc. A PCR usa uma série de mudanças de temperatura para produzir cópias de DNA por meio da amplificação.
RT-PCR é uma versão especial da técnica de PCR. É usado quando o RNA está sendo detectado. Agora é usado para testar COVID-19. RT-PCR é uma técnica bastante sensível e confiável. No RT-PCR, uma vez que uma amostra é coletada, produtos químicos são usados para remover proteínas, gorduras e outras moléculas indesejadas, deixando o RNA para trás. As enzimas do kit de teste primeiro convertem RNA em DNA, que então amplifica o DNA viral para detectar o vírus. Corantes fluorescentes são normalmente usados para se ligar ao DNA amplificado e produzir luz. Isso pode ser lido pela máquina para produzir o resultado do teste.
Quais são as semelhanças entre o teste LAMP e PCR?
- São técnicas de amplificação.
- Ambos produzem DNA copiado.
- São técnicas muito sensíveis e confiáveis do que técnicas imunológicas como detecção de anticorpos.
- Ambos são usados para testes de COVID-19.
Qual é a diferença entre o teste LAMP e PCR?
A principal diferença entre os testes LAMP e PCR é que, no LAMP, a amplificação é obtida usando uma temperatura constante (60-650C), enquanto no PCR, a ciclagem de temperaturas são necessárias. Vários tipos de técnicas LAMP estão disponíveis atualmente. Mas os mais importantes para a detecção do COVID-19 são a técnica isotérmica mediada por loop de transcrição reversa (RT-LAMP) e a amplificação mediada por transcrição (TMA). Além disso, diferentes tipos de técnicas de PCR também estão atualmente disponíveis na prática clínica para diagnóstico de doenças, como PCR em tempo real, RT-PCR, nested PCR, multiplex PCR, hot-start PCR, PCR de longo alcance, etc.
O infográfico abaixo lista as diferenças entre o teste LAMP e PCR em forma de tabela.
Resumo – Teste LAMP vs PCR
A amplificação isotérmica mediada por loop é um processo semelhante aos testes de PCR, como RT-PCR, mas produz mais cópias de DNA viral a uma temperatura constante. O teste de reação em cadeia da polimerase é atualmente a forma mais comum e padrão de teste no mundo para diagnóstico de doenças, como o diagnóstico de COVID-19. É visto como bastante confiável. A PCR usa uma série de mudanças de temperatura para produzir cópias de DNA por meio de amplificação. Assim, isso resume a diferença entre o teste LAMP e PCR.
