A principal diferença entre o ensaio de proteína bradford e lowry é que o ensaio de proteína de Bradford é baseado na mudança de absorbância do corante azul brilhante Coomassie G-250, enquanto o ensaio de proteína Lowry é baseado na reação de íons de cobre (Cu+) produzido pela oxidação de ligações peptídicas com reagente de Folin-Cioc alteu.
Um ensaio é uma técnica analítica que ajuda a caracterizar os principais componentes funcionais de uma amostra. Assim, um ensaio pode ser um teste qualitativo ou quantitativo. Muitos campos, incluindo medicina laboratorial, farmacologia, biologia ambiental, biologia molecular, bioquímica e imunologia, usam esse tipo de ensaio rotineiramente. O ensaio de proteína de Bradford e Lowry são dois ensaios bioquímicos que determinam a concentração de proteína em uma solução de amostra. Ambos os ensaios usam técnicas colorimétricas para fornecer resultados.
O que é Bradford Protein Assay?
O ensaio de proteína Bradford é um procedimento analítico espectroscópico rápido para análise de proteínas. Ele mostra alta precisão ao medir a concentração de proteína em uma solução. Marion Bradford introduziu este procedimento em 1976. Neste ensaio, a reação total é baseada na composição de aminoácidos das proteínas medidas. Em outros termos, o ensaio de proteína de Bradford é um ensaio colorimétrico. Ele usa o corante azul brilhante Coomassie. Assim, este ensaio de proteína colorimétrica depende da mudança de absorbância do corante. Coomassie brilhante azul G-250 existe em três formatos: catiônico (vermelho), aniônico (azul) e neutro (verde). Durante condições ácidas, a forma vermelha do corante é convertida em azul. Confirma a ligação da proteína. Se a proteína não estiver presente, a solução pode permanecer na cor marrom.
Figura 01: Ensaio de proteína de Bradford
O ensaio de proteína Bradford difere de outros ensaios de proteína, pois é menos suscetível a interferências de vários compostos químicos presentes na solução de proteína. Esses compostos incluem sódio, potássio, glicose e sacarose, etc.
O que é Lowry Protein Assay?
O ensaio de proteína Lowry é um ensaio bioquímico usado para determinar o nível total de proteína em uma solução. Oliver H. Lowry é a pessoa que desenvolveu este reagente em 1940. O procedimento mostra a concentração total de proteína da solução por uma mudança de cor que é proporcional à concentração de proteína na solução. Portanto, este também é um ensaio de proteína colorimétrico.
A reação entre os íons cobre (Cu+) produzidos pela oxidação das ligações peptídicas e o reagente de Folin-Cioc alteu é a base deste procedimento. Além disso, este reagente contém ácido fosfomolibdico e ácido fósforo-túngstico. No entanto, o mecanismo de reação do ensaio de proteína Lowry não é bem compreendido. Mas envolve a oxidação de resíduos de cisteína, triptofano e tirosina pela redução do reagente de Folin-Cioc alteu.
Figura 02: Ensaio de proteína Lowry
Os resíduos de cisteína contribuem para a absorbância observada no ensaio de proteína Lowry e a reação resulta em uma molécula azul brilhante; heteropoli molibdênio azul. A redução desta molécula é medida pela absorbância em 660nm. Assim, a concentração de resíduos de cisteína e triptofano que reduziram o reagente Folin-Cioc alteu deduz a concentração total da proteína na solução.
Quais são as semelhanças entre Bradford e Lowry Protein Assay?
- Os ensaios de proteína Bradford e Lowry determinam a concentração de proteína em uma solução.
- Ambos os métodos são métodos colorimétricos.
- Além disso, a sensibilidade de ambos os métodos é alta.
Qual é a diferença entre Bradford e Lowry Protein Assay?
O ensaio de proteína Bradford e Lowry são dois tipos de ensaios que determinam a concentração de proteína em uma solução. O ensaio de proteína de Bradford depende da mudança de absorbância do corante Coomassie brilhante azul G-250, enquanto o ensaio de proteína de Lowry depende da reação de íons de cobre produzidos pela oxidação de ligações peptídicas, com reagente de Folin-Cioc alteu. Portanto, esta é a principal diferença entre o ensaio de proteína Bradford e Lowry. O ensaio de proteína de Bradford leva 15 minutos para produzir um resultado, enquanto o ensaio de proteína de Lowery leva de 40 a 60 minutos para produzir um resultado. Assim, esta é outra diferença entre o ensaio de proteína de Bradford e Lowry. Além disso, o ensaio de proteína de Bradford é dependente da composição de aminoácidos, enquanto o ensaio de proteína de Lowry é parcialmente dependente da composição de aminoácidos. Portanto, essa também é uma diferença entre o ensaio de proteína de Bradford e Lowry.
Informações abaixo fornecem mais detalhes sobre a diferença entre o ensaio de proteína de Bradford e Lowry.
Resumo – Bradford vs Ensaio de Proteína Lowry
Um ensaio é uma técnica analítica usada para caracterizar o principal componente funcional de uma amostra. O ensaio de proteínas de Bradford e Lowry são dois tipos de ensaios de proteínas que funcionam sob técnicas colorimétricas. Os ensaios de proteína de Bradford e Lowry determinam a concentração de proteína em uma solução. No entanto, a principal diferença entre Bradford e Lowry Protein Assay está na técnica colorimétrica que eles usam. O ensaio de proteína de Bradford usa o azul brilhante de Coomassie G-250, enquanto o ensaio de proteína de Lowry usa íons de cobre (Cu+) e reagente Folin-Cioc alteu. Além disso, o método de Bradford fornece resultados rápidos do que o ensaio de proteínas Lowry. No entanto, ambos os métodos são métodos altamente sensíveis e estão sujeitos a interferências de várias substâncias.
