A principal diferença entre BL21 e DH5 Alpha é que BL21 é uma célula de E. coli competente geneticamente modificada deficiente em protease usada principalmente para expressão de proteínas, enquanto DH5 Alpha é uma célula de E. coli competente geneticamente modificada com mutação recA1 usada principalmente para transformação de plasmídeo.
E. coli é um dos famosos organismos de escolha para a produção de proteínas recombinantes. Tornou-se a plataforma de expressão mais popular ao longo dos anos. Também é usado como uma fábrica de células. BL21 e DH5 Alpha são duas células de E. coli geneticamente modificadas atualmente usadas para expressão de proteínas e transformação de plasmídeos, respectivamente.
O que é BL21?
BL21 é uma célula de E. coli competente geneticamente modificada deficiente em protease usada principalmente para expressão de proteínas. E. coli BL21 é uma célula bacteriana derivada da cepa B. Possui defeitos de protease Lon e protease de membrana externa ompT. É comumente usado para expressão de proteínas recombinantes porque normalmente traz estabilidade às proteínas expressas. BL21 é útil para a expressão de proteínas com pCold I-IV DNA e pCold TF DNA. Mas esta célula de E. coli competente não se destina a um sistema de expressão de proteínas usando o promotor T7, como o sistema pET. A razão por trás disso é que BL21 não expressa T7 RNA polimerase. Além disso, não é recomendado o uso para construção ou preparação de plasmídeo, pois não possui mutação recA.
Figura 01: BL21
BL21 foi descrito pela primeira vez por Studier em 1986 após várias modificações da linha B. As células BL21 são deficientes na protease LON, que degrada muitas proteínas estranhas. Além disso, está f altando outro gene que codifica a protease de membrana externa (OmpT) cuja função é degradar proteínas extracelulares. A f alta dessas proteínas desencadeia a produção bem sucedida de proteína estranha em células E. coli BL21. Além disso, a mutação de hsdSB nessas células evita a metilação do DNA estranho e a ruptura nas células BL21.
O que é DH5 Alpha?
DH5 Alpha é uma célula de E. coli competente geneticamente modificada com mutação recA1 que é usada principalmente para transformação de plasmídeo. As células DH5 Alpha E. coli são geneticamente modificadas pelo biólogo americano Douglas Hanahan para maximizar a eficiência da transformação. A célula DH5 Alpha tem três mutações distintas: recA1, endA1 e lacZΔM15. recA1 é uma mutação pontual que substitui a glicina 160 por um resíduo de ácido aspártico no polipeptídeo recA. Esta mutação desativa a atividade das recombinases e inativa a recombinação homóloga. A mutação endA1 inativa uma endonuclease intracelular que a impede de degradar o plasmídeo inserido.
Figura 02: DH5 Alfa
Além disso, a mutação lacZΔM15 permite a triagem azul-branca de células transformadas. Essas células são células competentes. Eles são frequentemente usados com transformação de cloreto de cálcio para inserir o plasmídeo desejado. Foi identificado por pesquisas recentes que a célula DH5 Alpha com o método Hanahan foi a célula competente mais eficiente para transformação de plasmídeo.
Quais são as semelhanças entre BL21 e DH5 Alpha?
- BL21 e DH5 Alpha são dois E.coli geneticamente modificados
- Ambas são células competentes.
- Eles consistem em mutações distintas.
- Ambos não têm habitat natural.
- Estes são usados para fins de laboratório, como estudos de expressão e procedimentos de clonagem.
Qual é a diferença entre BL21 e DH5 Alpha?
BL21 é uma célula de E. coli competente geneticamente modificada deficiente em protease usada principalmente para expressão de proteínas. Por outro lado, DH5 Alpha é uma célula de E. coli competente geneticamente modificada com mutação recA1 usada principalmente para transformação de plasmídeo. Então, esta é a principal diferença entre BL21 e DH5 Alpha. Além disso, a célula BL21 E. coli não possui mutação recA1, enquanto a célula DH5 Alpha E. coli possui mutação recA1.
O infográfico a seguir lista as diferenças entre BL21 e DH5 Alpha em forma de tabela.
Resumo – BL21 vs DH5 Alfa
As cepas não patogênicas de E. coli são geneticamente desenvolvidas por cientistas para estudos de expressão em laboratório e fins de clonagem. BL21 e DH5 Alpha são duas células de E. coli geneticamente modificadas. BL21 é usado principalmente para estudos de expressão de proteínas. Por outro lado, DH5 Alpha é usado principalmente para fins de transformação de plasmídeo. Assim, este é o resumo da diferença entre BL21 e DH5 Alpha.
