Diferença chave – Taq Polimerase vs DNA Polimerase
DNA polimerase é uma enzima que cria novo DNA a partir de seus blocos de construção (nucleotídeos). Em procariontes e eucariontes, são encontrados diferentes tipos de DNA polimerases. A duplicação do DNA é viável devido à presença dessas enzimas especiais, e a informação genética é passada para a prole pela ação das DNA polimerases. A Taq polimerase é um tipo especial de DNA polimerase que é termoestável e é amplamente utilizada em PCR. A Taq polimerase é encontrada em bactérias termofílicas e purificada na replicação de DNA in vitro. A principal diferença entre a Taq polimerase e a DNA polimerase é que a Taq polimerase pode suportar altas temperaturas sem desnaturar, enquanto outras DNA polimerases desnaturam em altas temperaturas (em temperaturas de degradação de proteínas).
O que é Taq Polimerase?
Taq polimerase (Taq DNA polimerase) é uma enzima usada para sintetizar DNA in vitro pela técnica de PCR. É produzido pela bactéria termofílica chamada Thermus aquaticus que vive em fontes termais e fontes termais. A Taq polimerase é uma enzima termoestável que não se degrada em altas temperaturas. A Taq polimerase foi purificada pela primeira vez e publicada em Chien et al. em 1976. A técnica de PCR é realizada com o auxílio da Taq polimerase devido à sua capacidade de tolerar altas temperaturas e flutuações de temperatura durante a PCR. A Taq polimerase catalisa a síntese de DNA quando há primers, nucleotídeos e DNA molde de fita simples. A enzima consiste em um único polipeptídeo com um peso molecular de aproximadamente 94 kDa. A Taq polimerase mostra sua atividade ótima a 80 °C e na faixa de pH de 7 a 8 com a presença de íons de magnésio. Possui atividade de polimerase e exonuclease. A enzima é composta por uma única cadeia polipeptídica e o gene da Taq polimerase contém alto teor de G e C (67.9%).
A polimerase Taq termoestável permite realizar PCR em altas temperaturas o que aumenta a especificidade dos primers e reduz a produção de produtos indesejados de PCR (dímeros de primers). A Taq polimerase também elimina a necessidade de adicionar novas enzimas à reação de PCR após cada ciclo de reação de PCR devido à sua capacidade de suportar altas temperaturas. A descoberta da Taq polimerase permitiu que a PCR funcionasse em um único tubo fechado em uma máquina relativamente simples. Devido a essas propriedades da Taq polimerase, a PCR torna-se uma técnica de laboratório realizada rotineiramente popular em muitas análises de biologia molecular relacionadas à análise de DNA.
Taq polimerase é amplamente utilizada em técnicas de biologia molecular, e há a necessidade de produção de Taq polimerase em larga escala. Portanto, usando a tecnologia de DNA recombinante e clonagem de genes, o gene que codificava a Taq DNA polimerase havia sido clonado e expresso em Escherichia coli. Isso facilitou muito a produção da Taq polimerase recombinante e reduziu o preço dessa enzima para uso adequado.
Figura 1: Taq Polimerase
O que é DNA Polimerase?
DNA polimerase é uma enzima que catalisa a síntese de DNA a partir de nucleotídeos. É a enzima mais precisa responsável por duplicar genomas e passar informações genéticas para a prole. Durante a divisão celular, a DNA polimerase duplica todo o seu DNA e passa uma cópia para cada célula filha. Em 1955, Arthur Kornberg foi descoberto DNA polimerase em E Coli. A função da DNA polimerase depende de vários requisitos; DNA molde, íons Mg+2, todos os quatro tipos de desoxinucleotídeos (dATP, dTTP, dCTP e d GTP) e uma sequência curta de RNA (primer). A síntese do DNA é feita na direção de 5' para 3' pela DNA polimerase.
As DNA polimerases podem ser agrupadas em sete famílias diferentes: A, B, C, D, X, Y e RT (transcriptase reversa). Os retrovírus codificam para RT; uma DNA polimerase incomum que precisa de um molde de RNA para a síntese de DNA. Existem cinco tipos diferentes de DNA polimerases encontrados em procariontes para diferentes funções na replicação do DNA. A DNA polimerase 3 é responsável pela polimerização da nova fita de DNA. A DNA polimerase 1 é responsável pela reparação e correção do DNA. As DNA polimerases 2, 4 e 5 são responsáveis pela reparação e revisão do DNA. Em eucariotos, existem 15 tipos distintos de DNA polimerases. Eles incluem cinco famílias principais.
Figura 2: DNA Polimerase
As polimerases de DNA são usadas na clonagem de genes, PCR, sequenciamento de DNA, detecção de SNP, diagnóstico molecular, etc. A polimerase Taq é um tipo de polimerase de DNA que pode tolerar altas temperaturas e estar disponível para síntese de DNA sem degradação.
Qual é a diferença entre Taq Polimerase e DNA Polimerase?
Taq Polimerase vs DNA Polimerase |
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| Taq DNA polimerase é uma enzima que cria DNA. É uma enzima termoestável encontrada em termófilos | DNA polimerase é uma enzima que facilita a replicação do DNA e encontrada em organismos procarióticos e eucarióticos. |
| Degradação em altas temperaturas | |
| Taq polimerase é ativa em altas temperaturas. | As polimerases de DNA se degradam em altas temperaturas de desnaturação de proteínas. |
| Usar | |
| Isso é amplamente utilizado em PCR | Taq polimerase substituiu a DNA polimerase de coli originalmente usada em PCR. |
Resumo – Taq Polimerase vs DNA Polimerase
DNA polimerases são as enzimas que sintetizam DNA a partir de desoxinucleotídeos (blocos de construção do DNA) quando o molde e os primers estão disponíveis. As DNA polimerases são necessárias para duplicar o DNA das células e passar para células filhas idênticas durante a divisão celular. As DNA polimerases adicionam novos nucleotídeos à extremidade 3' do primer e alongam a síntese da nova fita de DNA na direção 5' para 3'. Taq DNA polimerase é uma das enzimas DNA polimerase que é altamente útil no método de reação em cadeia da polimerase (PCR) de amplificação de DNA. A DNA polimerase 1 de E. coli foi usada anteriormente para PCR, mas a Taq polimerase comercial a suplantou devido à sua alta especificidade de ligação ao primer em temperaturas elevadas e à produção de maior rendimento do produto desejado com menos produto de amplificação não específico. Esta é a diferença entre a Taq Polimerase e a DNA Polimerase.
